預(yù)染marker的具體要求

  預(yù)染marker分子量范圍 – 10 種蛋白分子量范圍在10 到170kDa 之間。易于使用 – 與上樣緩沖液預(yù)先混合，可直接凝膠上樣，無需煮沸。條帶清晰 – 亮度類似，但顏色不同的條帶便于觀察。質(zhì)量檢測(cè) – 每批次均經(jīng)過SDS-PAGE 和Western blotting 驗(yàn)證。兩個(gè)參考條帶 – 70kDa 為橙色，10kDa 為綠色。與膜兼容 – Western blotting 時(shí)彩色條帶將轉(zhuǎn)移到膜上應(yīng)用，監(jiān)測(cè)SDS 聚丙烯酰胺凝膠電泳期間蛋白的遷移。監(jiān)測(cè)Western blotting 蛋白轉(zhuǎn)移到膜上的情況。測(cè)定SDS 聚丙烯酰胺凝膠和Western blots 上的蛋白分子量。

  預(yù)染marker細(xì)胞用含血清的培養(yǎng)液培養(yǎng)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，常規(guī)胰蛋白酶消化液消化細(xì)胞(懸浮細(xì)胞無需消化)。低速離心，收集細(xì)胞沉淀。用培養(yǎng)液重懸細(xì)胞沉淀，制備成單細(xì)胞懸液，并計(jì)數(shù)。細(xì)胞接種于96孔培養(yǎng)板，一般接種密度為3000～10000個(gè)細(xì)胞/孔。