預(yù)染marker的相對要求

 

  預(yù)染marker易于使用 – 與上樣緩沖液預(yù)先混合，可直接凝膠上樣，無需煮沸。條帶清晰 – 亮度類似，但顏色不同的條帶便于觀察。質(zhì)量檢測 – 每批次均經(jīng)過SDS-PAGE 和Western blotting 驗(yàn)證。兩個(gè)參考條帶 – 70kDa 為橙色，10kDa 為綠色。與膜兼容 – Western blotting 時(shí)彩色條帶將轉(zhuǎn)移到膜上應(yīng)用，監(jiān)測SDS 聚丙烯酰胺凝膠電泳期間蛋白的遷移。監(jiān)測Western blotting 蛋白轉(zhuǎn)移到膜上的情況。測定SDS 聚丙烯酰胺凝膠和Western blots 上的蛋白分子量。

 

 

 

  預(yù)染marker可以直接觀察到預(yù)染蛋白分子量的出現(xiàn)方便了我們的實(shí)驗(yàn)，這種蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)可以幫助我們在電泳時(shí)、電泳后，以及轉(zhuǎn)膜后監(jiān)測電泳情況和估計(jì)遷移率——比如，已知垂直電泳*分辨區(qū)域大約在膠的2/3處，如果使用預(yù)染Marker就可以預(yù)測目標(biāo)蛋白進(jìn)入*分辨區(qū)時(shí)停止電泳以得到*分辨效果;如果觀察到Marker電泳異常也可以及時(shí)終止電泳;另外在Western Blot轉(zhuǎn)膜以后可以直接觀察蛋白轉(zhuǎn)膜是否*。