免疫（共）沉淀——命中注定我愛你！

更新時間：2019-01-09 點擊次數(shù)：3723

愛必信absin免疫(共)沉淀(IP/CoIP)試劑盒（貨號：abs955），現(xiàn)兩件6折、100T僅需3000元！截止2019年1月11日。

免疫共沉淀(CoIP)是研究蛋白質(zhì)相互作用的經(jīng)典方法，其基于抗體和蛋白的特異性親和作用，通過捕獲與蛋白或抗原特異性結(jié)合的抗體，進(jìn)而從復(fù)雜的樣品中捕獲及富集目標(biāo)蛋白，同時可以測定與之相互作用的蛋白或其它生物大分子。

免疫沉淀(IP)則主要是利用抗體特異性反應(yīng)純化富集目的蛋白的一種方法。

（互作蛋白A和B，與對應(yīng)抗體結(jié)合后，再與偶聯(lián)beads的Protein A/G結(jié)合）

免疫（共）沉淀（IP/CoIP）主要實驗流程見上圖：

（1）轉(zhuǎn)染表達(dá)目的蛋白的質(zhì)粒后，后續(xù)主要是轉(zhuǎn)染表達(dá)目的蛋白的質(zhì)粒（2）對樣本的裂解處理，（3）蛋白和抗體、珠子的孵育，（4）免疫復(fù)合物沉淀洗滌之后，（5）再進(jìn)行后續(xù)分析，常規(guī)是做WB，也有用質(zhì)譜分析的。

可以看出，CoIP本身的實驗流程并不復(fù)雜，只是為了拿到靠譜又漂亮的結(jié)果、需要我們不斷優(yōu)化實驗條件，包括裂解液的選擇、抗體的選擇、Protein A與G的選擇和使用量、beads的選擇等。

小編收集了以下常見的免疫（共）沉淀需注意點：

1. 細(xì)胞裂解采用溫和的裂解條件，不能破壞細(xì)胞內(nèi)存在的蛋白質(zhì)－蛋白質(zhì)相互作用，多采用非離子變性劑（NP40 或Triton X-100)。每種細(xì)胞的裂解
條件是不同的，需要通過經(jīng)驗和試驗確定。不能用高濃度的變性劑（0.2％SDS)，細(xì)胞裂解液中要加各種酶抑制劑。

2. 免疫（共）沉淀需要注意點就是抗體的性質(zhì)。抗體不同、其和抗原的結(jié)合能力也不同，WB、IHC能結(jié)合未必能用在IP反應(yīng)。建議仔細(xì)檢查抗體的
說明書。特別是多抗的特異性是問題。

3. 需充分考慮抗體/緩沖液的比例。抗體過少則不能檢出抗原，過多則不能沉降在beads上，殘存在上清。緩沖劑太少則不能溶解抗原，過多則抗原
被稀釋。

4. 如果拿到免疫復(fù)合物后用WB檢驗，必須在實驗前預(yù)測目的蛋白是什么，以選擇后檢測的抗體，若預(yù)測不正確，實驗就得不到結(jié)果，實驗本身具有
冒險性。

那么做CoIP，我們需要拿到怎樣的實驗驗證結(jié)果、從而有效證明我們的猜測呢？

Figure from INMAP Overexpression Inhibits Cell Proliferation, Induces Genomic Instability and Functions through p53/p21 Pathways , Zhu Y et al.PLoS One. 2015 Jan 30;10(1)

上圖是CoIP驗證實驗的典型結(jié)果圖片。INMAP是一個在有絲分裂中起重要作用的蛋白，保證了紡錘體和端粒的完整性，作者通過CoIP驗證研究了INMAP通過P53/P21途徑起作用。

文章的C和D圖中，研究者分別使用Flag單抗和p21抗體，拉下目的蛋白及其互作蛋白后，通過Input的陽性、control組normal lgG的陰性和終WB分析互作蛋白的陽性，充分驗證、結(jié)論令人信服！

所以，命中注定的愛情、果然還是需要經(jīng)過層層考驗驗證吶！

愛必信作為一個致力于為中國科研事業(yè)服務(wù)的中國品牌，我們開發(fā)的明星爆款產(chǎn)品免疫(共)沉淀(IP/CoIP)試劑盒采用蛋白特異結(jié)合能力*的ProteinA、ProteinG為捕獲載體，目的蛋白捕獲能力高，試驗結(jié)果重復(fù)性和一致性均得到有效驗證。

abs955 免疫(共)沉淀(IP/CoIP)試劑盒組分如下：

試劑組分	包裝規(guī)格
Lysis buffer	30ml*1
10*Wash buffer	50ml*1
1*SDS 樣品緩沖液	1ml*1
Protein A 瓊脂糖珠	250μl*1
Protein G 瓊脂糖珠	250μl*1

我們的產(chǎn)品優(yōu)勢：

1. 采用Protein A、Protein G作為捕獲載體，更加節(jié)省抗體；

3. 主要輔助試劑均包含在內(nèi)，一站式解決IP/CoIP實驗煩惱；

5. 高性價比，足夠?qū)嶒?0次！

2. 試劑盒內(nèi)組分及操作流程經(jīng)實驗優(yōu)化，確保更高的檢測靈敏度；
4. 實驗結(jié)果重復(fù)性好；

目前愛必信免疫共沉淀試劑盒團(tuán)購*、2件6折，截止2019年1月11日不要錯過哦。

貨號	產(chǎn)品名稱	規(guī)格	原價	*	貨期
abs955	免疫(共)沉淀(IP/CoIP)試劑盒	50tests×2	2500×2	1500×2	現(xiàn)貨

愛必信特色產(chǎn)品線(全部現(xiàn)貨)：
二抗、標(biāo)簽抗體、對照抗體；WB相關(guān)：ECL發(fā)光液、預(yù)染marker、預(yù)制膠；IHC相關(guān)：二抗試劑盒、組化筆；IP/CoIP試劑盒；細(xì)胞因子、信號通路調(diào)節(jié)劑；血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE；凋亡試劑盒、呼吸爆發(fā)試劑盒；動植物提取物，定制服務(wù)(抗體/多肽/蛋白)...

愛必信(上海)生物科技有限公司

公眾平臺：愛必信生物

上一篇：2018年使用absin產(chǎn)品發(fā)表的文章超過100篇
下一篇：愛必信（Absin）客戶文章（115-120）