免疫（共）沉淀——命中注定我愛你！

愛必信absin免疫(共)沉淀(IP/CoIP)試劑盒（貨號：abs955），現兩件6折、100T僅需3000元！截止2019年1月11日。

免疫共沉淀(CoIP)是研究蛋白質相互作用的經典方法，其基于抗體和蛋白的特異性親和作用，通過捕獲與蛋白或抗原特異性結合的抗體，進而從復雜的樣品中捕獲及富集目標蛋白，同時可以測定與之相互作用的蛋白或其它生物大分子。

免疫沉淀(IP)則主要是利用抗體特異性反應純化富集目的蛋白的一種方法。

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（互作蛋白A和B，與對應抗體結合后，再與偶聯beads的Protein A/G結合）

免疫（共）沉淀（IP/CoIP）主要實驗流程見上圖：

（1）轉染表達目的蛋白的質粒后，后續主要是轉染表達目的蛋白的質粒（2）對樣本的裂解處理，（3）蛋白和抗體、珠子的孵育，（4）免疫復合物沉淀洗滌之后，（5）再進行后續分析，常規是做WB，也有用質譜分析的。

可以看出，CoIP本身的實驗流程并不復雜，只是為了拿到靠譜又漂亮的結果、需要我們不斷優化實驗條件，包括裂解液的選擇、抗體的選擇、Protein A與G的選擇和使用量、beads的選擇等。

小編收集了以下常見的免疫（共）沉淀需注意點：

那么做CoIP，我們需要拿到怎樣的實驗驗證結果、從而有效證明我們的猜測呢？

Figure from INMAP Overexpression Inhibits Cell Proliferation, Induces Genomic Instability and Functions through p53/p21 Pathways , Zhu Y et al.PLoS One. 2015 Jan 30;10(1)

上圖是CoIP驗證實驗的典型結果圖片。INMAP是一個在有絲分裂中起重要作用的蛋白，保證了紡錘體和端粒的完整性，作者通過CoIP驗證研究了INMAP通過P53/P21途徑起作用。

文章的C和D圖中，研究者分別使用Flag單抗和p21抗體，拉下目的蛋白及其互作蛋白后，通過Input的陽性、control組normal lgG的陰性和終WB分析互作蛋白的陽性，充分驗證、結論令人信服！

所以，命中注定的愛情、果然還是需要經過層層考驗驗證吶！

愛必信作為一個致力于為中國科研事業服務的中國品牌，我們開發的明星爆款產品免疫(共)沉淀(IP/CoIP)試劑盒采用蛋白特異結合能力*的ProteinA、ProteinG為捕獲載體，目的蛋白捕獲能力高，試驗結果重復性和一致性均得到有效驗證。

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