凋亡檢測試劑盒如何檢測細胞凋亡

　　在正常細胞中，磷脂酰絲氨酸只分布在細胞膜脂質(zhì)雙層的內(nèi)側(cè)，細胞發(fā)生凋亡早期，膜磷脂酰絲氨酸（PS）由脂膜內(nèi)側(cè)翻向外側(cè)，這一變化早于細胞皺縮、染色質(zhì)濃縮、DNA（脫氧核糖核酸）片斷化和細胞膜的通透性增加等凋亡現(xiàn)象。AnnexinV是一種磷脂結(jié)合蛋白，與磷脂酰絲氨酸有高度親和力，故可通過細胞外側(cè)暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細胞的胞膜結(jié)合。因此AnnexinV被作為檢測細胞早期凋亡的靈敏指標(biāo)之一。碘化丙啶（PropidiumIodide,PI）是一種核酸染料,它不能透過完整的細胞膜，但凋亡中晚期的細胞和死細胞由于細胞膜通透性的增加，PI能夠透過細胞膜而使細胞核染紅。因此將AnnexinV與PI匹配使用，就可以將處于不同凋亡時期的細胞區(qū)分開來。

　　細胞凋亡是一個形態(tài)學(xué)概念，對其形態(tài)的觀察是用凋亡檢測試劑盒研究凋亡的基本方法。細胞凋亡的形態(tài)學(xué)變化是多階段的，起初，細胞間連接和微絨毛消失.細胞體積縮小，胞漿凝縮，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)變疏松并與胞膜融合，形成一個個空抱，核搪體與線粒體等細胞器聚集，結(jié)構(gòu)尚無明顯改變，細胞核內(nèi)的染色質(zhì)逐漸凝聚成新月狀附在核膜周邊，細胞核固縮呈勻一的致密物，進而斷裂成碎塊，此時細胞膜仍保持完整;然后，胞膜及核膜不斷出芽、脫落，一個細胞變成數(shù)個大小不等的有膜包裹的凋亡小體;后，凋亡小體被周圍具有吞噬能力的細胞如巨噬細胞、上皮細胞等吞噬、消化。在凋亡發(fā)生的全過程中，細胞膜一直保持完整。同一組織中，不同細胞發(fā)生凋亡的進程并不同步。