多重免疫組化VS免疫熒光

更新時間：2020-12-17 點擊次數：2345

免疫熒光技術（Immunofluorescence technique，IF ）又稱熒光抗體技術，是標記免疫技術中發展早的一種。它是在免疫學、生物化學和顯微鏡技術的基礎上建立起來的一項技術。很早以來就有一些學者試圖將抗體分子與一些示蹤物質結合，利用抗原抗體反應進行組織或細胞內抗原物質的定位。

多重免疫組化（mIHC）：主要的技術原理來自TSA技術，TSA即酪酰胺信號放大(Tyramide signal amplification)是一類利用辣根過氧化酶（HRP）對靶蛋白或核酸進行高密度原位標記的酶學檢測方法。該技術可與高性能染料Alexa Fluor®、傳統熒光染料和比色檢測系統相兼容。 TSA主要原理是利用酪胺Tyramide的過氧化物酶反應(酪胺鹽在HRP催化H202下形成共價鍵結合位點)，產生大量的酶促產物，該產物能與周圍的蛋白殘基(包括色氨酸、組氨酸和酪氨酸殘基)結合，這樣在抗原-抗體結合部位就有大量的生物素沉積，與隨后加入的Streptavidin—HRP/熒光基團結合，經幾次這樣的循環放大，可以結合大量的酶分子or熒光基團，結果使其檢測信號得到幾何級放大。

mIHC和IP的區別：

	多重免疫組化(mIHC)	免疫熒光(IP)
靶點數量	可同時染色7色（含dapi）	一般標記三種(含dapi)大于三種效果差
一抗種類	同一種屬的不同抗體即可滿足要求	不同種屬的不同抗體
二抗種類	不同種屬的不同抗體	連接熒光探針的不同種屬二抗
染色策略	分步染色，多次重復進行免疫組化操作	樣本抗原的空間位置的差異，需要設計復雜的染色策略。樣本/靶點的差異導致染色策略的差異，染色過程復雜、多變
染色效果	高染色分辨率和染色特異性，信號強度更強,更穩定,淬滅時間更長，無背景影響，各靶點的信噪比大大提高，尤其適合組織基于單細胞的定量分析	亮度較弱,容易淬滅,各種抗體間存在互相影響，背景較高，對基于單細胞的定量分析不利。
實驗成本	1同一種屬的一抗和二抗，價格相對便宜。 2簡單的染色策略和無需任何重復的預實驗，即可掌握整個染色技術，大大縮小了預實驗的材料損耗。 3一抗和二抗工作濃度更低,單次費用更低	1不同種屬的抗體價格存在差異，一般種屬稀少的價格高。 2不同種屬的二抗，價格存在差異，一般稀少的種屬價格高。 3尋找合適的染色策略，復雜的多次重復的預實驗大大的增加了實驗成本
應用范圍	二抗具備通用性，因此實驗室中所有的研究領域均可使用	二抗不具備通用性，實驗室中應用領域受到局限

相關產品和服務推薦：

多重熒光免疫組化染色試劑盒

多重熒光免疫組化服務

貨號	產品名稱
abs50012	四色多重熒光免疫組化染色試劑盒(鼠兔通用二抗）
abs50013	五色多重熒光免疫組化染色試劑盒（鼠兔通用二抗）
abs50014	六色多重熒光免疫組化染色試劑盒（鼠兔通用二抗）
abs50015	七色多重熒光免疫組化染色試劑盒（鼠兔通用二抗）
abs50028	四色多重熒光免疫組化染色試劑盒(抗兔二抗）
abs50029	五色多重熒光免疫組化染色試劑盒（抗兔二抗）
abs50030	六色多重熒光免疫組化染色試劑盒（抗兔二抗）
abs50031	七色多重熒光免疫組化染色試劑盒（抗兔二抗）

Absin特色產品線(全部現貨)：
WB相關：ECL發光液、預染marker、預制膠；IHC相關：二抗試劑盒、組化筆；IP/CoIP試劑盒；激動劑/抑制劑；血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE；凋亡試劑盒；呼吸爆發試劑盒；ELISA試劑盒；重組蛋白；抗體: 二抗、標簽抗體、對照抗體；定制服務(抗體/多肽/蛋白/標記/檢測)...