mIHC在腫瘤免疫浸潤和趨化因子受體表達(dá)研究的應(yīng)用

mIHC在腫瘤免疫浸潤和趨化因子受體表達(dá)研究的應(yīng)用：
 

多重?zé)晒饷庖呓M化技術(shù)（mIHC）利用酪氨信號放大技術(shù)（TSA），對不同抗原進(jìn)行多輪次染色標(biāo)記，可對單一切片進(jìn)行至多六指標(biāo)七色的染色，對于研究多種細(xì)胞之間的原位相互作用很有幫助，涉及到研究多細(xì)胞或多指標(biāo)之間相互作用的領(lǐng)域都可以采用mIHC的技術(shù)替代傳統(tǒng)的IHC或IF，來獲得更高通量的研究結(jié)果。主要的應(yīng)用領(lǐng)域如下圖所示： 
文章展示了多重?zé)晒饷庖呓M化技術(shù)的多種應(yīng)用和數(shù)據(jù)分析策略，今天我們就來詳細(xì)解讀一下。

在mIHC的發(fā)展中，大多數(shù)應(yīng)用mIHC的研究集中在腫瘤相關(guān)領(lǐng)域，腫瘤微環(huán)境及藥效評估方面應(yīng)用尤其多，之前的文章中小編也已經(jīng)為大家多次分享了相關(guān)應(yīng)用，感興趣的小伙伴們可以查閱之前的文章。 
今天再和大家分享一篇多重?zé)晒饷庖呓M化腫瘤免疫浸潤和趨化因子受體表達(dá)研究的應(yīng)用，幫助大家更好的理解mIHC。

這項亞研究利用多重免疫組化(mIHC)和轉(zhuǎn)錄組分析，從7個可用的2期臨床試驗患者中篩選匹配的治療前后腫瘤標(biāo)本，研究新輔助IRX-2導(dǎo)致LI增加的機(jī)制。多重免疫組化顯示cd68表達(dá)細(xì)胞(5例)、t細(xì)胞密度(4例)和PDL1平均熒光強(qiáng)度(4例)顯著增加。與IRX-2激活多種免疫細(xì)胞一致，轉(zhuǎn)錄組分析顯示NK細(xì)胞、B細(xì)胞、CD4C T細(xì)胞、CD8C T細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞相關(guān)基因的表達(dá)平均增加，而中性粒細(xì)胞相關(guān)基因的表達(dá)則沒有增加。大多數(shù)免疫亞群基因的平均表達(dá)增加，比較明顯的是B細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞(2 ~ 3倍)。

圖1到7中的分布圖顯示了每個患者切除前和切除后匹配的腫瘤標(biāo)本的免疫亞群基因表達(dá)譜。多重免疫組化圖像顯示了IRX-2治療前后腫瘤組織中免疫細(xì)胞種類的數(shù)量和分布的變化。在大多數(shù)情況下，個體患者的數(shù)據(jù)證明了多重免疫組化和轉(zhuǎn)錄組分析結(jié)果之間的一致性。數(shù)據(jù)顯示，在反應(yīng)程度方面存在異質(zhì)性，7例患者中有6例患者治療后CD3C T細(xì)胞和CD68C巨噬細(xì)胞明顯增加。

作者研究了在7個亞研究患者中，IRX-2治療前后PDL1平均熒光強(qiáng)度(MFI)的總體變化。 7例患者中有2例Foxp3基因表達(dá)下降。Foxp3基因的平均表達(dá)從治療前活檢的7.17下降到切除腫瘤樣本的7.03 (log2量表)，7例患者中有4例CD4CFoxp3C細(xì)胞通過多重免疫組化檢測下降

mIHC方法可以允許在一張切片上同時標(biāo)記多種marker，可以原位的展現(xiàn)多種細(xì)胞之間的相互作用，在臨床科研和疾病診斷中都有很大的潛力，今天小編給大家分析的在腎臟移植排異反應(yīng)研究中的應(yīng)用就是如此，mIHC方法的應(yīng)用，幫助科學(xué)家發(fā)現(xiàn)更精細(xì)的免疫細(xì)胞募集區(qū)域，為探秘臨床減輕排異反應(yīng)提供了更多可能性。
今天的分享就到這了，感興趣的小伙伴們可以關(guān)注愛必信的多重?zé)晒饷庖呓M化試劑盒及實驗服務(wù)，相信看文章的你們也可以得到這樣漂亮實驗結(jié)果和好的實驗發(fā)現(xiàn)！

【愛必信mIHC服務(wù)】

* 我們可以提供的服務(wù)：
Absin多重?zé)晒饷庖呓M化服務(wù)提供預(yù)實驗驗證-染色-拍照-分析全過程。
高達(dá)六指標(biāo)七色（含DAPI）的多色免疫組化服務(wù)（芯片高達(dá)四指標(biāo)五色），樣本涵蓋石蠟切片、冰凍切片及組織芯片（TMA），組織大片請?zhí)峁﹩螇K組織切片，F(xiàn)FPE樣本，厚度3-5um。正式實驗比較好每例2張，1張備用。預(yù)實驗樣本數(shù)量根據(jù)預(yù)實驗方案定。

(* 所有抗體指標(biāo)需要您提供)

* 我們可以提供的服務(wù)結(jié)果：

1.五色及以下提供全片200X（相當(dāng)于物鏡20X，目鏡10X）原圖，六七色提供視野200X圖片，選定視野一般默認(rèn)3視野，超過視野單獨收費，收費標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)具體情況訂，提供看圖軟件可在客戶端打開。數(shù)據(jù)上傳網(wǎng)盤1G以內(nèi)，或用U盤寄送1G以上。
2.客戶要求區(qū)域的單細(xì)胞分析結(jié)果：

• 單陽性細(xì)胞占有核細(xì)胞百分比，密度。
• 雙陽性細(xì)胞占有核細(xì)胞百分比，密度。
• 組織面積和特定病理形態(tài)面積計算。
• TMA提供每個芯點的以上定量結(jié)果。

Absin多色試劑盒（abs50032） 

組分信息： SuperNova系列染料（可選）、信號放大反應(yīng)液、鼠兔通用型或者抗兔抗鼠HRP標(biāo)記二抗、抗熒光淬滅封片劑、DAPI
產(chǎn)品特點： 可快速完成高達(dá)六指標(biāo)七色的熒光多標(biāo)記； 染料經(jīng)過優(yōu)化處理，相比普通染料，強(qiáng)度更高，持續(xù)時間更長； 有組化經(jīng)驗即可操作，染色無需特殊儀器，提供詳細(xì)的protocol