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                mRNA疫苗研究爆品——全能核酸酶

                更新時(shí)間:2021-12-16      點(diǎn)擊次數(shù):1430
                MultiNuclease全能核酸酶,又稱廣譜核酸酶,是一種來源于Serratia Marcescens的非限制性核酸內(nèi)切酶。它能夠在非常廣泛的條件下(6 M urea,0.1 M Guanidine HCl,0.4% Triton X100,0.1% SDS,1 mM EDTA,1 mM PMSF)降解所有形式的(雙鏈、單鏈、線狀、環(huán)狀或超螺旋形式)DNA和RNA,生成含有5’-磷酸末端的3-5個(gè)寡核苷酸殘基片段,廣泛用于去除生物制品中的核酸。

                產(chǎn)品介紹:
                本品經(jīng)基因工程改造在Escherichia coli (E. coli)中表達(dá)純化,不僅可在科學(xué)研究中降低細(xì)胞上清和細(xì)胞裂解液的粘度,提高蛋白純化效率及功能研究;還可以應(yīng)用在病毒純化、疫苗生產(chǎn)、蛋白和多糖類制藥工業(yè)作為宿主殘留核酸去除試劑,將宿主殘留核酸降至皮克(pg)級別從而提高生物制品功效和安全性;并且可以有效防止細(xì)胞治療和疫苗研究中人外周血單核細(xì)胞(PBMC)的結(jié)團(tuán)。
                該酶與 BacReady-Protein Extraction Solution 和 RIPA LysisBuffer 等蛋白抽提試劑配合使用,從而消除粗提物中的核酸,降低粘度。
                純度:≥95%
                內(nèi)毒素含量:< 0.25EU/1500U
                比活:≥1.1*106U/mg

                使用方法

                1、樣本準(zhǔn)備:
                貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)基,用 PBS 清洗細(xì)胞,去除上清。
                懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用 PBS 清洗細(xì)胞,6,000 rpm 離心 10 min,收集沉淀。
                大腸桿菌:離心收集菌體,用 PBS 清洗 1 次,8,000 rpm 離心 5 min,收集沉淀。
                2、樣品處理:
                將收集到的細(xì)胞沉淀按照質(zhì)量(g)與體積(mL)比 1:(10~20) 的比例進(jìn)行裂解處理,也可通過在冰上或室溫通過機(jī)械或化學(xué)方法裂解細(xì)胞(1 g 細(xì)胞約為 109 個(gè))。
                3、酶的添加:
                按照 250 Units 消化 1 g 細(xì)胞沉淀的比例添加,也可以跟據(jù)上表中的推薦使用量自行選定添加方案,在一定范圍內(nèi)增加酶量,消化所需時(shí)間相應(yīng)減少。
                4、上清獲取:
                以 12,000 rpm 的轉(zhuǎn)速離心 30min 獲得細(xì)胞裂解液上清,再進(jìn)行后續(xù)相關(guān)實(shí)驗(yàn)。
                【注】若溶液為高鹽溶液,偏酸性或者偏堿性,含有較高濃度的去垢劑、變性劑,應(yīng)適當(dāng)增加酶的用量或延長孵育時(shí)間。


                產(chǎn)品信息

                貨號名稱規(guī)格
                abs60157全能核酸酶10KU/10KU*5/250KU/500KU


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