類器官原代培養全流程

更新時間：2022-11-17 點擊次數：1407

準備工作

1.儀器設備

CO2 培養箱、雙人單面超凈臺、倒置顯微鏡、臺式冷凍離心機、水浴鍋、水浴搖床，醫用冰箱、-80°冰箱、移液器（一套）、眼科剪、眼科鑷。

2.試劑耗材

小腸類器官培養基，小腸類器官消化液，小腸組織保存液，小腸類器官緩沖液，硫酸慶大霉素，雙抗，組織固定液，基質膠，60mm細胞培養皿， 100μm濾篩，15ml離心管，1.5ml EP管若干，4度冰盒，眼科剪刀，眼科鑷。

操作流程

1.類器官操作流程之——樣本準備

（1）將組織放入含有器官保存液的取樣瓶中，4℃從醫院/實驗室取回。

（2）將取樣瓶消毒，組織取出放入培養皿樣本拍照，并登記，大小，顏色，軟硬程度，組織類型等信息。

2. 類器官操作流程之——清洗-剪碎

添加含有雙抗、慶大霉素的類器官緩沖液浸泡，用眼科鑷刮去腸道粘膜，腸絨毛等。在培養皿中用類器官緩沖液清洗三次（每次更換培養皿）后剪碎，剪成大約1mm3的組織塊。靜置2次。

3. 類器官操作流程之——消化-過濾

（1）用組織消化液在37℃進行消化10-15min（消化過程中隨時觀察消化情況）。

（2）類器官緩沖液終止消化，用槍頭輕柔吹打可以看到液體變渾濁。

（3）使用100μm孔徑的篩網進行過濾，取少量濾液在鏡下進行觀察，可以看到明顯的隱窩狀組織結構。

4. 類器官操作流程之—離心、加膠。

基質膠計算：第3步后觀察收集到的組織體積，添加25倍組織體積的基質膠。

5. 類器官操作流程之——鋪板

加500-750μl 類器官培養基培養

6.類器官操作流程之——觀察

本期推薦

類器官培養基試劑盒

培養簡單：培養基集成多種因子，無需添加其他因子和再優化；

擴增效率高：培養的類器官能夠快速增長；

維持穩定傳代：維持至少3代以上擴增，部分類器官每次傳代可實現10代以上擴增；

性價效益比：按照GMP級別生產條件下制備，批次質量穩定，價格優勢明顯。

貨號	品名	規格
abs9446	Organotial乳腺癌類器官培養基試劑盒	1kit
abs9448	Organotial子宮內膜癌類器官培養基試劑盒	1kit
abs9445	Organotial結直腸癌類器官培養基試劑盒	1kit
abs9444	Organotial肝癌類器官培養基試劑盒	1kit
abs9443	Organotial肺癌類器官培養基試劑盒	1kit
abs9449	Organotial胃癌類器官培養基試劑盒	1kit
abs9447	Organotial胰腺癌類器官培養基試劑盒	1kit

基質膠

貨號	品名	規格	周期
abs9410	即用型基質膠	100ml	現貨
abs9490	基質膠（標準型、含酚紅）	1.5ml*8	現貨
abs9491	基質膠（標準型、無酚紅）	1.5ml*8	現貨
abs9492	基質膠（高濃度、含酚紅）	1.5ml*8	現貨
abs9493	基質膠（高濃度、無酚紅）	1.5ml*8	現貨
abs9494	基質膠（低因子、含酚紅）	1.5ml*8	現貨
abs9495	基質膠（低因子、無酚紅）	1.5ml*8	現貨
abs9496	基質膠（IPS驗證無酚紅）	1.5ml*4	現貨
abs9497	基質膠（高濃度、低因子、含酚紅）	1.5ml*8	現貨
abs9498	基質膠(高濃度，無酚紅，低生長因子)	1.5ml*8	現貨

Absin特色產品線：
WB相關：ECL發光液、預染marker、預制膠；IHC相關：二抗試劑盒、組化筆；IP/CoIP試劑盒；激動劑/抑制劑；血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE；凋亡試劑盒；呼吸爆發試劑盒；ELISA試劑盒；重組蛋白；抗體: 二抗、標簽抗體、對照抗體；定制服務(抗體/多肽/蛋白/標記/檢測)...

上一篇：助力核酸藥物開發“黑馬”—環狀RNA
下一篇：科學培養指南——類器官