細(xì)胞因子相關(guān)問題，千萬別忽視！

更新時間：2023-08-18 點(diǎn)擊次數(shù)：1262

細(xì)胞因子（cytokine，CK）是免疫原、絲裂原或其他刺激劑誘導(dǎo)多種細(xì)胞產(chǎn)生的低分子量可溶性蛋白質(zhì)，具有調(diào)節(jié)固有免疫和適應(yīng)性免疫、血細(xì)胞生成、細(xì)胞生長以及損傷組織修復(fù)等多種功能。

absin細(xì)胞因子

細(xì)胞因子具有以下作用特點(diǎn)：

多向性和靶向性：一種細(xì)胞因子可由多種細(xì)胞產(chǎn)生，作用于不同的靶細(xì)胞。例如，IL-5既可以來源于Th2細(xì)胞，也可以來源于肥大細(xì)胞，既能活化B細(xì)胞增殖，又能促進(jìn)嗜酸性粒細(xì)胞分化、成熟，

即時性：基本不儲存，隨時產(chǎn)生并發(fā)揮作用。

局部性：通常以自分泌或者旁分泌的形式作用于周圍細(xì)胞。

相互協(xié)調(diào)：以網(wǎng)絡(luò)形式發(fā)揮作用，不同細(xì)胞因子間相互抑制或促進(jìn)。

多重調(diào)節(jié)：發(fā)揮的效應(yīng)與細(xì)胞因子濃度、靶細(xì)胞類型、其他細(xì)胞因子種類以及種屬有關(guān)。

常見細(xì)胞因子的作用：

名稱	功能
FGF	堿性成纖維細(xì)胞生長因子，bFGF，F(xiàn)GF basic 或 FGF 2 屬于一個大的 FGF 蛋白家族，后者與包括增殖、生長和分化的細(xì)胞發(fā)育的許多方面有關(guān)。FGF-basic 是一種維持胚胎干細(xì)胞在培養(yǎng)中保持未分化狀態(tài)的關(guān)鍵成分。
IL	IL是一類能夠雙向調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)的細(xì)胞因子家族，主要參與免疫細(xì)胞的分化和激活。IL可劃分為IL-1細(xì)胞因子家族、共γ鏈細(xì)胞因子家族、IL-10細(xì)胞因子家族、IL-12細(xì)胞因子家族等；
EGF	表皮生長因子，是一種有效的促有絲分裂因子，在體內(nèi)和體外的生長、增殖和各種表皮和上皮組織和細(xì)胞培養(yǎng)中的一些成纖維細(xì)胞中起重要作用。EGF 產(chǎn)生的失調(diào)與某些癌癥的生長和進(jìn)展有關(guān)。
INF	干擾素，具有抗病毒、抑制細(xì)胞增殖、調(diào)節(jié)免疫及抗腫瘤作用。

由于天然的細(xì)胞因子表達(dá)量低，分泌具有短時自限性，難以收集提純，一般通過蛋白重組技術(shù)獲得，即先用基因克隆或化學(xué)合成技術(shù)獲得目的基因，連接到適合的表達(dá)載體，導(dǎo)入到特定的宿主細(xì)胞，利用宿主細(xì)胞的遺傳系統(tǒng)，表達(dá)出有功能的蛋白質(zhì)分子。目前常用的有原核、真核、昆蟲、哺乳動物四種表達(dá)系統(tǒng)。

表達(dá)系統(tǒng)	特點(diǎn)
原核	產(chǎn)量高、蛋白常為包涵體，無翻譯后修飾，大分子蛋白表達(dá)困難
酵母	便于純化，部分翻譯后修飾有時出現(xiàn)蛋白切割問題，糖基化不能滿足要求
昆蟲	表達(dá)的大多數(shù)蛋白是可溶的，適合毒性蛋白，表達(dá)激酶等定位于細(xì)胞內(nèi)的真核蛋白
哺乳動物	完善的翻譯后加工，活性接近天然蛋白，技術(shù)要求高，表達(dá)量低

選擇細(xì)胞因子時要注意以下幾個問題：

1）細(xì)胞因子作為動物免疫抗原進(jìn)行檢測類抗體的研究，蛋白純度需大于80%；若用于晶體及晶體結(jié)構(gòu)研究，蛋白純度需大于95%；
2）若需選擇不同種屬來源的細(xì)胞因子，則要判斷兩種種屬的細(xì)胞是否有交叉反應(yīng)活性。一般來說，不同種屬之間蛋白同源性(序列一致性)在80%以上的基本上可確定為有交叉活性；
3）根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪x擇想要的產(chǎn)品時，我們還需要關(guān)注一下內(nèi)毒素的水平，特別是作為細(xì)胞添加物使用時。

許多老師在收到凍干粉之后由于保存或者溶解不當(dāng)造成實(shí)驗(yàn)結(jié)果不理想，小愛也遇到過很多老師詢問，產(chǎn)品室溫保存了兩個月還能用嗎？溶解不了怎么回事？細(xì)胞因子儲存和溶解其實(shí)都很簡單，愛必信的細(xì)胞因子說明書中給了明確標(biāo)注。

1、收到的凍干粉如何處理？

我們收到的凍干蛋白一般不會立即使用，這種情況下可放置-20℃儲存，室溫一般儲存三周左右，具體時間可參照說明書，請老師們妥善保存收到的產(chǎn)品。

2、凍干蛋白一般如何溶解？

敲黑板！！！溶解前，一定要將凍干粉離心收集于離心管底部，不同的凍干蛋白需要的溶解劑不同，比如，abs04698重組人IL4使用中蒸餾水即可溶解， abs04177 IGF-I蛋白需溶解在500mM乙酸中，這是由PH和離子濃度能多種因素決定的，大家一定要仔細(xì)閱讀說明書，此外，一定要溶解到說明書推薦的濃度范圍，否則可能會造成活性減弱。

3、溶解方式

用槍頭輕輕捶打即可，對于相對較難溶解的，可以在低速搖床上靜止兩小時左右，切不可劇烈震蕩。

4、溶解后的蛋白如何儲存呢？

重組蛋白溶液一般可在4-7°C下儲存2-7天。避免反復(fù)凍融可將溶液分裝于聚丙烯管中（不會吸附蛋白），在<-20°C下穩(wěn)定保存3個月左右，適當(dāng)加入載體蛋白（BSA、HAS、FBS等）可減少管壁對重組蛋白的吸附損耗。

愛必信提供多種細(xì)胞因子，純度高、內(nèi)毒素含量低，可登錄了解更多信息。

小愛本期推薦：

貨號	品名	規(guī)格
abs04842	Mouse IL17A Protein	100μg/500μg/1mg
abs04176	Recombinant Human Epidermal Growth Factor/EGF	10μg/50μg/500μg/1mg
abs04045	Recombinant Human Interleukin-2/IL-2	10μg/50μg/100μg
abs04695	Recombinant Human Noggin	10μg/50μg/500μg/1mg
abs04398	Recombinant Human R-Spondin-1/RSPO1 (C-6His)	10μg/50μg/500μg/1mg
abs04697	Recombinant Mouse IL-4	10μg/50μg/100μg
abs00975	Recombinant Mouse IL-7	10μg
abs04100	Recombinant Mouse Interleukin-2/IL‐2	10μg/50μg/500μg/1mg
abs07000	Recombinant Mouse Interleukin-23/IL-23	10μg/50μg/500μg/1mg
abs04204	Recombinant Human Transforming Growth Factor β-1/TGFB1	10μg/50μg/1mg

好消息！Absin文獻(xiàn)獎勵重磅升級！

Absin特色產(chǎn)品線：

WB相關(guān)：ECL發(fā)光液、預(yù)染marker、預(yù)制膠；IHC相關(guān)：二抗試劑盒、組化筆；IP/CoIP試劑盒；激動劑/抑制劑；血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE；凋亡試劑盒；呼吸爆發(fā)試劑盒；ELISA試劑盒；重組蛋白；抗體: 二抗、標(biāo)簽抗體、對照抗體；定制服務(wù)(抗體/多肽/蛋白/標(biāo)記/檢測)...