生化檢測試劑盒 | 銅離子檢測助力腫瘤治療研究

背景介紹：

銅濃度檢測在藥物發現和環境監測中得到廣泛應用。銅是人體必需的微量元素。銅蛋白酶在鐵和兒茶酚胺代謝，在清除自由基，血紅蛋白，彈性蛋白，膠原等方面扮演著重要角色。銅主要存在于肝臟中的銅藍蛋白中。銅含量過低會導致智力低下、色素缺失、貧血、肌肉緊張癥、骨質壞血病等疾病。

銅離子檢測在腫瘤研究中的應用：

歷史研究表明，銅穩態失調與多種腫瘤有關，如婦科腫瘤、結直腸癌等，而癌癥患者血清銅水平的升高與癌癥分級和化療耐藥性有關，如果銅的濃度超過一定的閾值，就會中毒，導致一種新細胞死亡形式，稱為銅中毒，這種方式也被視為癌癥治療的潛在方法。

2023年10月20日，上海市第一人民醫院黃陳教授和范廣建教授團隊在Nature Communications雜志上發表了題為“Lactylation of METTL16 promotes cuproptosis via m6A-modification on FDX1 mRNA in gastric cancer"的研究論文。本研究揭示了METTL16調控胃癌細胞銅死亡的分子機制，闡明乳酰化修飾及m6A修飾在胃癌進展中的重要意義，為胃癌的治療提供新的靶標和策略。

圖 運用銅離子檢測試劑盒abs580140對48例胃癌患者的胃癌組織裂解物進行了銅含量檢測

銅離子檢測試劑盒：

另需自備的材料：酶標儀（可讀取605nm處的吸光度）、蒸餾水、移液器與槍頭、離心機、計時器等。

操作步驟（以組織樣本為例）：

1、樣本處理：稱取1g組織，與1mL Assay buffer在冰上勻漿，10000g 4℃離心10min，取上清液至新離心管中，冰上保存待檢測。

2、試劑準備：

標準品：用蒸餾水二倍連續稀釋標準品；

圖 標準品二倍連續稀釋示例

Masking Reagent：使用1mL蒸餾水溶解（現配現用）；
Dye Reagent：使用1mL Dye Reagent Diluent溶解Dye Reagent，70℃加熱助溶（現配現用）。

3、上樣：分別將140uL不同濃度的標準品、樣品加入相應孔中，另設置空白孔加入140uL蒸餾水；每孔分別加入40uL Reaction Buffer，10uL Masking Reagent以及10uL Dye Reagent，混合均勻，室溫孵育15min。

4、檢測與計算：使用酶標儀測量605nm處的吸光度，擬合標準曲線并計算樣本濃度。

圖 標曲示例

注意事項：

1）金屬螯合劑（如EDTA）會干擾此分析，在樣品制備中應避免使用；
2）對于未知的樣品，建議多做幾個稀釋梯度進行預實驗，確保讀數在標準曲線范圍內；
3）試劑盒中的Dye Reagent需要現配現用，配好的溶液無法儲存，可能影響顯色讀數進而影響檢測；如果樣本需要分批檢測，建議分批收樣儲存，待樣本收齊后統一檢測；
4）每次實驗必須重新檢測并繪制標準曲線。

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