Jurkat（Clone E6-1）細(xì)胞培養(yǎng)攻略

Jurkat（Clone E6-1）概述：

Jurkat（Clone E6-1）細(xì)胞，人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞，是肯德爾·史密斯博士將Jurkat細(xì)胞在41°C孵育48h，于巨噬細(xì)胞上進(jìn)行有限稀釋克隆得到的，Jurkat（Clone E6-1）細(xì)胞是從14歲男性急性T細(xì)胞白血病患者的外周血建立的。在用佛波酯和針對(duì)T3抗原的凝集素或單克隆抗體刺激后產(chǎn)生大量的IL-2（需要兩種刺激物誘導(dǎo)IL-2的產(chǎn)生）。可用于免疫系統(tǒng)疾病研究、免疫學(xué)和免疫腫瘤學(xué)研究，該細(xì)胞株克服了Jurkat細(xì)胞系建立初期易被支原體污染的缺點(diǎn)。

圖 Jurkat細(xì)胞系譜

Jurkat（Clone E6-1）基本信息：

圖 Jurkat（Clone E6-1）形態(tài)圖

Jurkat（Clone E6-1）換液方法：

補(bǔ)液法：培養(yǎng)過程中發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基變黃，則補(bǔ)加適量的新鮮培養(yǎng)基（1-2mL左右），補(bǔ)充2-3次后，1200rpm （約250g）3min，全部離心，棄上清，將細(xì)胞沉淀重懸于新的培養(yǎng)基中；

半換液法：豎起培養(yǎng)瓶靜置一段時(shí)間（10min左右），待細(xì)胞沉入底部，小心吸出約一半的培養(yǎng)基，轉(zhuǎn)移到離心管離心，若有細(xì)胞沉淀，用少量培養(yǎng)基重選后再移入培養(yǎng)瓶，培養(yǎng)瓶瓶補(bǔ)充新鮮培養(yǎng)基；

注意：上述過程中若發(fā)現(xiàn)細(xì)胞密度超過1×10⁶ cells/mL則考慮換液，建議細(xì)胞密度保持在1×10⁵-1×10⁶cells/mL, 細(xì)胞密度不可超過3×10⁶/mL。

圖 半換液示意圖

培養(yǎng)要點(diǎn)：

1、該細(xì)胞受密度影響較大，低密度時(shí)細(xì)胞生長速度較慢，接種和培養(yǎng)時(shí)注意細(xì)胞密度；
2、Clone E6-1復(fù)蘇后有時(shí)需要5-7d才能恢復(fù)到凍存前的狀態(tài)，前兩天勿對(duì)其進(jìn)行操作；
3、建議凍存密度提高到2-3×10⁶/mL，凍存率可達(dá)到70%左右；
4、若發(fā)現(xiàn)較大細(xì)胞團(tuán)，可用槍頭輕微吹散，切勿用力過度，對(duì)其產(chǎn)生機(jī)械刺激。

Jurkat（Clone E6-1）的應(yīng)用：

1、Jurkat（Clone E6-1）已被廣泛用作TCR信號(hào)通路的遺傳和生化分析的有力工具；

2、Jurkat和Jurkat（Clone E6-1）都可用于成像研究，以確定超抗原特異性結(jié)合物中免疫突觸（IS）組裝的關(guān)鍵；

圖 E6.1 LFA-1high和Raji細(xì)胞(APC)的15min綴合物進(jìn)行免疫熒光分析

3、Jurkat細(xì)胞模型已廣泛應(yīng)用于T細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞因子和受體的表達(dá), 以及各類感染性疾病的治療和機(jī)制研究中, 如HIV、EB、丙型肝炎等病毒的感染研究，其實(shí)驗(yàn)結(jié)果可作為人周圍血淋巴細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)研究和前期實(shí)驗(yàn)。

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*本文圖片來源于網(wǎng)絡(luò)，僅供學(xué)習(xí)參考用

[1] Cassioli C, Balint S, Compeer EB, et al. Increasing LFA-1 Expression Enhances Immune Synapse Architecture and T Cell Receptor Signaling in Jurkat E6.1 Cells. Front Cell Dev Biol. 2021;9:673446. Published 2021 Jul 23. doi:10.3389/fcell.2021.673446
[2] Chen JL, Nong GM. [Advances in application of Jurkat cell model in research on infectious diseases]. Zhongguo Dang Dai Er Ke Za Zhi. 2018 Mar;20(3):236-242. Chinese. doi: 10.7499/j.issn.1008-8830.2018.03.014. PMID: 29530126; PMCID: PMC7389782.
 

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