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                做好這些,讓基質(zhì)膠流暢到底

                更新時(shí)間:2025-03-18      點(diǎn)擊次數(shù):257

                一、收到貨后請(qǐng)檢查

                 

                1、泡沫箱內(nèi)是否有干冰

                2、基質(zhì)膠是否呈固態(tài),膠面是否平整;

                3、基質(zhì)膠的顏色是否在正常范圍內(nèi)(不含酚紅為白色/乳白色,含酚紅為:黃色-粉紅色-深紅色,由溫度變化決定);

                4、收到貨后如果不是立刻使用基質(zhì)膠,應(yīng)立即將其放進(jìn)-20/-80℃冰箱長(zhǎng)期保存。

                 

                二、操作流程說(shuō)明

                 

                每次使用基質(zhì)膠前,應(yīng)嚴(yán)格按照以下基質(zhì)膠操作流程說(shuō)明進(jìn)行解凍操作!!!

                 

                1、提前在-20℃下預(yù)冷“基質(zhì)膠冰盒(abs7289)“(或者準(zhǔn)備碎冰)和200μL槍頭1個(gè)小時(shí)以上,在傍晚下班前將基質(zhì)膠從-20/-80℃冰箱取出并放入“基質(zhì)膠冰盒“(或?qū)⒒|(zhì)膠埋于鋪滿碎冰的冰盒)中,然后再將整個(gè)冰盒一起放入4℃冰箱進(jìn)行過(guò)夜解凍

                2、第二天,解凍完成后可進(jìn)行基質(zhì)膠使用。將基質(zhì)膠從4℃冰箱取出,立即放入-20℃預(yù)冷的“基質(zhì)膠分裝冰盒"(碎冰盒)中,隨后在超凈操作臺(tái)/生物安全柜中進(jìn)行無(wú)菌使用;

                3、使用時(shí),取出-20℃預(yù)冷的200μL槍頭,并打開(kāi)基質(zhì)膠瓶蓋(盡可能保證基質(zhì)膠瓶在基質(zhì)膠解凍冰盒上操作);

                4、使用基質(zhì)膠,立即放回冰盒,置于4℃冰箱短期保存即可,兩周內(nèi)使用完畢。

                 

                三、必讀的注意事項(xiàng)

                 

                1、實(shí)驗(yàn)人員的手心不要直接地接觸基質(zhì)膠部分;

                2、整個(gè)使用過(guò)程都要在預(yù)冷的基質(zhì)膠分裝冰盒(碎冰盒)上進(jìn)行,該次實(shí)驗(yàn)用不完的基質(zhì)膠可以放在4℃至多保存兩周

                3一定不要將基質(zhì)膠直接丟在冰箱中解凍和保存,一定要放在“基質(zhì)膠冰盒“(或?qū)⒒|(zhì)膠埋于鋪滿碎冰的冰盒)中再放入4度冰箱解凍或保存;此外,不要放在冰箱門邊解凍或保存,也不要放在經(jīng)常敞開(kāi)口取放試劑的冰箱解凍或保存,盡可能放在4度冰箱靠里面/抽屜內(nèi)/出冷風(fēng)口處解凍或保存;

                4由于基質(zhì)膠對(duì)溫度敏感,故建議使用非除霜型且溫度穩(wěn)定的冰箱進(jìn)行融解、保存,請(qǐng)一定不要在帶有自動(dòng)除霜的冰箱中解凍基質(zhì)膠;

                5如使用碎冰盒過(guò)夜解凍,應(yīng)固定好基質(zhì)膠瓶位置,確保過(guò)夜碎冰融化后基質(zhì)膠瓶不會(huì)傾倒,冰水不會(huì)浸沒(méi)基質(zhì)膠瓶口

                6基質(zhì)膠使用過(guò)程應(yīng)避免反復(fù)凍融

                7液體基質(zhì)膠會(huì)在8℃以上快速成膠(特別是高濃度基質(zhì)膠)。因此,使用時(shí),接觸到基質(zhì)膠的耗材必須預(yù)冷(如移液管、吸頭、EP管等),并且整個(gè)實(shí)驗(yàn)必須在無(wú)菌、冰上操作

                8使用時(shí)的基質(zhì)膠在冰上應(yīng)呈現(xiàn)液態(tài),若在冰上使用時(shí)基質(zhì)膠已經(jīng)凝固,說(shuō)明分裝操作未能保持低溫,導(dǎo)致基質(zhì)膠已經(jīng)成膠,不宜再使用;

                9如果發(fā)現(xiàn)放置在4度冰箱中基質(zhì)膠很粘稠,但還是液態(tài),可以將其放入一個(gè)-20預(yù)冷的冰盒中,放入-20℃冰箱靜置3-5min,流動(dòng)性一般都會(huì)恢復(fù)正常;如果不能恢復(fù),則可能為冰箱溫度太高導(dǎo)致凝膠,建議不要使用。

                 

                、Q&A

                 

                Q1:為什么我的基質(zhì)膠很粘稠?

                 

                A1:基質(zhì)膠的蛋白濃度越高,膠體越粘稠。如果濃度高于13.0mg/mL,基質(zhì)膠會(huì)顯得非常濃稠。基質(zhì)膠產(chǎn)品在未稀釋前都會(huì)比較粘稠。粘稠的高濃度基質(zhì)膠不稀釋也可以直接使用,如用于培養(yǎng)腫瘤細(xì)胞和/或血管生成因子,注射于小鼠體內(nèi)后,細(xì)胞可以保持原位,便于原位分析和/或以后的切除;或者稀釋后,按照標(biāo)準(zhǔn)濃度的基質(zhì)膠產(chǎn)品使用方法使用,具體稀釋濃度根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求確定。

                 

                A2:除因?yàn)楫a(chǎn)品本身濃度高而粘稠外,基質(zhì)膠的狀態(tài)還與運(yùn)輸過(guò)程中溫度的變化和儲(chǔ)藏條件有關(guān)。整個(gè)運(yùn)輸過(guò)程中必須使用干冰運(yùn)輸。如果儲(chǔ)藏基質(zhì)膠的冰箱帶有自動(dòng)除霜功能,冰箱除霜過(guò)程中升溫,可能使基質(zhì)膠成膠。所以,切忌將基質(zhì)膠儲(chǔ)藏于此類帶有自動(dòng)除霜冰箱中。為保證基質(zhì)膠的使用效果,凍融次數(shù)應(yīng)該盡可能減少。特別注意:水的溫度傳遞、冰的溫度傳遞、冰水的溫度傳遞和空氣的溫度傳遞不同,空氣溫度傳遞特別慢和溫度分布不均一,因此基質(zhì)膠解凍不能直接丟在2-8度冰箱解凍,一定要放在冰/冰水混合物中,再放入0-4的冰箱解凍。


                 

                今天講解就到這了,大家如有實(shí)驗(yàn)問(wèn)題,歡迎一起交流哦!

                  

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                基質(zhì)膠(低因子,無(wú)酚紅)

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