預染marker高特異性的能力
更新時間：2017-08-18 點擊次數：1696
預染marker可直接凝膠上樣，無需煮沸。條帶清晰 – 亮度類似，但顏色不同的條帶便于觀察。質量檢測 – 每批次均經過SDS-PAGE 和Western blotting 驗證。兩個參考條帶 – 70kDa 為橙色，10kDa 為綠色。與膜兼容 – Western blotting 時彩色條帶將轉移到膜上應用，監測SDS 聚丙烯酰胺凝膠電泳期間蛋白的遷移。監測Western blotting 蛋白轉移到膜上的情況。測定SDS 聚丙烯酰胺凝膠和Western blots 上的蛋白分子量。
預染marker可提高特異性的識別能力。在做westen blot時，用惰性蛋白質或非離子去污劑封閉膜上的未結合位點可以降低抗體的非特異性結合。封閉劑應該封閉所有未結合位點而不替換膜上的靶蛋白、不結合靶蛋白的標委、也不與抗體或檢測試劑有交叉反應。zui常見的封閉劑是BSA、脫脂奶粉、酪蛋白、明膠和Tween-20(0.05 - 0.1%)稀溶液。
預染marker在電泳過程中或者轉膜時可以直接觀察到。預染蛋白分子量的出現方便了我們的實驗，這種蛋白分子量標準可以幫助我們在電泳時、電泳后，以及轉膜后監測電泳情況和估計遷移率——比如，已知垂直電泳*分辨區域大約在膠的2/3處，如果使用預染Marker就可以預測目標蛋白進入*分辨區時停止電泳以得到*分辨效果;如果觀察到Marker電泳異常也可以及時終止電泳;另外在Western Blot轉膜以后可以直接觀察蛋白轉膜是否*，還可以在膜上標記蛋白分子量，所以吸引了許多實驗室人員購買預染蛋白標準。
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