PI細胞周期與凋亡試劑盒

簡要描述：PI細胞周期與凋亡試劑盒產品基于碘化丙啶（Propidium, PI）染色方法分析細胞周期和凋亡。碘化丙啶是一種雙鏈DNA染料，其嵌入雙鏈DNA中可以產生熒光，熒光的強度和雙鏈DNA的量成正比。

產品型號：abs50005
廠商性質：生產廠家
更新時間：2025-03-26
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細胞生物學

重組蛋白原代細胞分離細胞培養細胞檢測細胞/組織處理外泌體研究其它動物血清 3D/類器官培養

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詳細介紹

品牌	absin	貨號	abs50005
供貨周期	現貨	應用領域	生物產業

產品描述

描述

本產品基于碘化丙啶（Propidium, PI）染色方法分析細胞周期和凋亡。碘化丙啶是一種雙鏈DNA染料，其嵌入雙鏈DNA中可以產生熒光，熒光的強度和雙鏈DNA的量成正比。

在正常細胞周期中，G0和G1期有1套染色體，G2和M期細胞有2套染色體，S期介于兩者之間。經PI染色后，處在不同細胞周期中的細胞的熒光強度不同。假定G0和G1期的細胞熒光強度為 1，那么G2和M期的細胞的熒光強度為2，S期的細胞介于1和2之間。

PI細胞周期與凋亡試劑盒細胞凋亡時，由于細胞核皺縮和DNA的片段化，染色時DNAd的片段會從打孔的細胞膜處丟失，流式細胞儀檢測時，熒光強度小于 1，即Sub-G1峰或者凋亡細胞峰。

細胞凋亡也可以用流式細胞儀觀察細胞光散射的變化來檢測。凋亡前期，染色質皺縮，細胞密度增加，前向角光散色顯著降低。凋亡后期，細胞產生凋亡小體，前向角光散射和側向角光散色都顯著降低。

PI細胞周期與凋亡試劑盒產品組分：

編號	名稱	50T
A	Propidium Iodide（20×）	1.25ml
B	RNase A（50×）	500 μl
C	Staining Buffer	25ml

應用

本產品用于培養的貼壁細胞或者懸浮細胞檢測，也可用于組織細胞檢測。

使用方法

自備耗材和設備：
1 ml 移液器
100-200 μl 移液器
旋窩混勻儀
流式細胞儀
PBS
75%乙醇

適用實驗與操作過程：
1、細胞準備貼壁細胞：棄細胞培養液，胰酶消化，制備單細胞懸液， 1000 g離心5分鐘，棄上清。沉淀用1 ml預冷的PBS重懸。再次 1000 g離心5分鐘，棄上清。懸浮細胞：收集細胞懸液，1000 g離心5分鐘，棄上清。沉淀用1 ml預冷的PBS重懸。再次1000 g離心5分鐘，棄上清。組織細胞：將組織塊用剪刀剪成盡量小的小塊后，用0.25%的胰酶消化0.5-1個小時。經過200-400目篩網過濾得到單細胞懸液。 1000 g離心5分鐘，棄上清，沉淀用1 ml預冷的PBS重懸。再次 1000 g離心5分鐘，棄上清。注意，最后一次離心，棄上清后留50 μl上清，渦旋混勻。
2、細胞固定細胞沉淀用1 ml -20 ℃預冷的75%乙醇輕輕混勻，4℃固定2小時以上或者過夜。然后，1000 g離心5分鐘，輕輕棄上清，沉淀用1 ml預冷的PBS重懸，1000 g離心5分鐘，棄上清。
3、染色 PI染色工作液配置： 0.5 ml染色緩沖液（C液）中加入25μl PI 染液（A液）和10 μl RNase A（B液），混勻待用。每個細胞樣品加入0.5 ml配置好的PI染色工作液，輕輕混勻重懸細胞。37℃，避光孵育30分鐘，直接上流式細胞儀檢測（5小時內完成為佳）。激發波長為488 nm，檢測紅色熒光。注意：每個檢測細胞數不超過1×106個。

注意事項

1、PI具有毒性，操作時應注意防護，保護眼睛、避免吸入、并戴一次性手套。
2、PI存在淬滅現象，保存和使用過程中注意避光。

基本信息

別名

PI細胞周期與凋亡試劑盒

儲存/保存方法

-20 ℃避光保存，有效期12個月。

溫馨提示：本產品僅作科研實驗使用，不支持臨床等研究

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