Blasticidin S solution

10mg/ml

Blasticidin S solution 使用濃度：
1、大腸桿菌（E.coli），（常用濃度：25-100ug/ml）E.coli對(duì)Blasticidin S敏感性很弱，但含Blasticidin S抗性的轉(zhuǎn)化子可在低鹽LB固體培養(yǎng)基（pH 8.0）100ug/ml Blasticidin S的條件下進(jìn)行篩選。高pH可增強(qiáng)抗生素篩選活性。
2、哺乳動(dòng)物細(xì)胞（常用濃度：1-50ug/ml）
哺乳動(dòng)物細(xì)胞系BlasticidinS的常用工作濃度范圍1-50ug/ml。初次實(shí)驗(yàn)建議通過(guò)滅殺曲線來(lái)確定最佳使用濃度。
操作步驟：
Blasticidin S常用濃度范圍1-50ug/ml，以10ug/ml為多，初次實(shí)驗(yàn)建議通過(guò)滅殺曲線來(lái)確定最佳使用濃度。攜帶bsr或BSD基因的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞后，用含有Blasticidin S的正常生長(zhǎng)培養(yǎng)基來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)克隆。
1、轉(zhuǎn)染48h后，用含適宜濃度BlasticidinS的新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞傳代；【注】：細(xì)胞處于活躍分裂期時(shí)抗生素工作最好。細(xì)胞密度太高，抗生素效率降低。分盤(pán)時(shí)覆蓋率最好不超過(guò)25%。
2、每3-4天去除舊培養(yǎng)基，加入含相同濃度BlasticidinS的新鮮培養(yǎng)基；
3、7天后評(píng)估細(xì)胞集落形成。根據(jù)宿主細(xì)胞種類(lèi)和轉(zhuǎn)染/篩選效率，集落形成可能需要再增加一周或更久。
轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆到35mm細(xì)胞培養(yǎng)盤(pán)，加入選擇培養(yǎng)基維持培養(yǎng)7天。隨后進(jìn)行細(xì)胞毒性檢測(cè)。

-20℃保存，至少1年有效，避免反復(fù)凍融。

1、Blasticidin S為有毒化合物，操作時(shí)需注意防護(hù)，切勿與身體或皮膚直接接觸。

2、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

殺稻瘟菌素S（滅瘟素）

溶液