纖維蛋白酶；9002-04-4

產(chǎn)品描述：

纖維蛋白酶（Thrombin）來源于牛血漿，分子量37KD，是由兩條肽鏈（31KD和6KD）通過二硫鍵組成的。Thrombin是蛋白質(zhì)水解酶，其催化纖維蛋白原（Fibrinogen）水解掉A肽和B肽，由此形成纖維蛋白單體，單體進(jìn)一步聚合，在血小板、紅細(xì)胞和白細(xì)胞等參與下形成血凝塊。

6、性價(jià)比及其突出，尤其對(duì)于工業(yè)客戶，國(guó)內(nèi)產(chǎn)品的價(jià)格，國(guó)際頂尖產(chǎn)品質(zhì)量。

來源：牛血漿

純度：2000U/mg

使用方法：

（一）融合蛋白切割由于Thrombin具有切割序列專一性強(qiáng)，水解效率高的特點(diǎn)，它被廣泛地應(yīng)用于基因工程產(chǎn)品的開發(fā)，其應(yīng)用之一是作為工具蛋白酶用于重組融合蛋白質(zhì)的特異性斷裂，尤其適用于生物工程制藥業(yè)及基因工程、生物化學(xué)、分子生物學(xué)等研究。 Thrombin是一種廣泛用于切割標(biāo)簽的蛋白酶，能夠有效切質(zhì)量比僅為1:2000的蛋白。切割可在20℃到37℃之間切割0.3到16小時(shí)。Thrombin最佳的切割位點(diǎn)是X4-X3-P-R[K]-X1'-X2',這里X4 和 X3 是疏水氨基酸而X1'和 X2'是非酸性氨基酸，一些經(jīng)常使用的識(shí)別位點(diǎn)是L-V-P-R-G-S,L-V-P-R-G-F,和MY-P-R-G-N。在X4-X3-P-R-G-X2'之間切割比在X4-X3-P-K-L-X2'更有效。其他識(shí)別位點(diǎn)是 X2-R[K]-X1', 例如A-R-G和G-K-A，這里切割發(fā)生在第二個(gè)殘基后。有效的消化緩沖液是20mM Tris-HCl緩沖液,含150mM氯化鈉,pH8.0。Thrombin可從切割產(chǎn)物中用p-氨基瓊脂糖親和純化,或者苯甲脒瓊脂糖移去。

（二）血小板聚集試驗(yàn) Thrombin與血小板表面的Thrombin受體結(jié)合，活化血小板，使血小板粘附和聚集。 血小板聚集實(shí)驗(yàn)參照文獻(xiàn)：兔血用塑料管收集和用ACD(86 mmol／L檸檬酸鈉，111 mmol／L葡萄糖，53 mmol／L檸檬酸)0.15體積比抗凝，200 g離心10 min，離心2次，取上清，800g離心15 min。沉淀中加Tyrode—Hepes緩沖液(140 mmol／L NaCl，5 mmol／L KCl，1 mmol／L MgCl2，10 mmol／L Hepes，10mmol／L葡萄糖，pH 7.4)調(diào)節(jié)至血小板數(shù)為(3～4)×1011／L。血小板聚集用血液凝集儀來測(cè)定。血小板懸液(0.2ml )與藥物溫育1 min，然后用Thrombin(500 u／L)作用5 min，記錄聚集情況。

技術(shù)指標(biāo)：

儲(chǔ)備溶液可在0.1%（w/v）BSA溶液中以100單位/ml的濃度制備。儲(chǔ)備溶液在0–5°C下保持活性一周。由于Thrombin溶液吸附到玻璃上，因此建議將溶液等份放入塑料管中，并在-20°C下儲(chǔ)存，以便長(zhǎng)期儲(chǔ)存。

BSA使用水或PBS配置溶液