【推薦】蛋白marker精彩問答

在WB過程中，分子量Marker就像個螺絲釘一樣，只是個小細節(jié)，然而就是這樣一個小細節(jié)對實驗結(jié)果有著不可忽視的作用。這個WB參照家族的一員的作用主要是用來指示蛋白條帶所對應(yīng)的分子量大小，只有標(biāo)準(zhǔn)量無誤了，實驗結(jié)果才有說服力，除此之外，蛋白標(biāo)準(zhǔn)還有表示轉(zhuǎn)移成功或者蛋白在凝膠上的電泳程度等等的作用，所以選擇正確的蛋白Marker也是WB實驗成功的必要條件之一。 本篇討論Western Blot實驗中關(guān)于蛋白Marker的常見問題分析，有助于成功完成WB。

Q：預(yù)染蛋白Marker是什么？有何用途？

A：預(yù)染蛋白Marker是一些純化好的蛋白，通過與染料共價耦聯(lián)后混合而成。在電泳過程中或者轉(zhuǎn)膜時可以直接觀察到。預(yù)染蛋白Marker的出現(xiàn)方便了我們的實驗，這種蛋白Marker可以幫助我們在電泳時、電泳后，以及轉(zhuǎn)膜后監(jiān)測電泳情況和估計遷移率——比如，已知垂直電泳*分辨區(qū)域大約在膠的2/3處，如果使用預(yù)染Marker就可以預(yù)測目標(biāo)蛋白進入*分辨區(qū)時停止電泳以得到*分辨效果;如果觀察到Marker電泳異常也可以及時終止電泳;另外在Western Blot轉(zhuǎn)膜以后可以直接觀察蛋白轉(zhuǎn)膜是否*，還可以在膜上標(biāo)記蛋白分子量。所以越來越受到使用者的熱捧。

Q：蛋白Marker為什么跑的條帶不清楚？

A：原因很多哦，首先確認(rèn)膠的濃度、PH值，離子強度是不是正常，這些都會影響條帶的質(zhì)量。其次確定電泳液的PH、離子強度是否正確，如甘氨酸濃度太低時，蛋白會濃縮不好；電泳液新鮮配制。

其次，確認(rèn)蛋白Marker是否降解或者染料是否脫落。absin生產(chǎn)的預(yù)染蛋白Marker采用*的技術(shù)，能保證染料不會從蛋白上脫落。且經(jīng)過試驗證實，預(yù)染蛋白Marker能在4°C保存3月之久，而不易降解。

Q：預(yù)染蛋白Marker的種類？

A：預(yù)染蛋白Marker可以分為兩種：單色預(yù)染和多色預(yù)染。Marker條帶越多參考價值越大，可就越難辨認(rèn)區(qū)分，如果用不同的顏色來區(qū)別就比較好辨認(rèn)啦。absin為您提供了含多種染料的預(yù)染Marker，方便您區(qū)分分子量區(qū)間。其所涵蓋的分子量范圍從10kDa到245kDa，*日常所需。

A：預(yù)染蛋白Marker與染料共價耦聯(lián)，所以在不同的緩沖條件下電泳時遷移特性可能會發(fā)生某些變化，可能導(dǎo)致一些偏差。不過多數(shù)情況下Marker的條帶未必能和我們的目標(biāo)蛋白*一樣，我們得到的也不過是一種相對Marker指示的參考大小，zui后都需要Western來定性，所以如果不是要區(qū)分大小相近的條帶，預(yù)染Marker還是很好用的，而且也可以和未染色的蛋白標(biāo)準(zhǔn)一起使用。另外，absin提供了在常用的電泳緩沖體系下，預(yù)染蛋白Marker的相對分子量，方便使用者對分子量的預(yù)判。

Q：愛必信廣譜型蛋白預(yù)染marker特點是什么？

A：

     1、使用方便：可在冷水或熱水中快速溶解，可直接上樣，無需加熱或煮沸；

     2、與各種膜兼容：彩色條帶在WB中可轉(zhuǎn)移到膜上成像；

     3、更清晰，更易觀察；

     4、每批次均經(jīng)過SDS-PAGE和WB的驗證  

     5、足量耐用：一支500ul至少跑100塊8*10cm膠

     6、不易降解

Q：愛必信廣譜型蛋白預(yù)染marker實驗結(jié)果圖？