細胞培養小分子藥物配制方法解析

科研實驗中我們經常需要配制各種濃度的試劑。例如細胞實驗一般需要加入小分子激動劑/抑制劑；分子轉化實驗一般會加入抗生素；免疫實驗需要加入免疫刺激物/免疫佐劑等。這些昂貴的試劑濃度一旦計算錯誤，不僅挑燈夜戰得來的數據毀于一旦，早日發文的愿望也隨之破滅，可謂一失足成千古恨。今天小愛就為大家解決這一難題，讓我們學會快速換算試劑濃度，擺脫科研失誤。

我們買來的小分子抑制劑一般是凍干粉，需要把它配制成溶液。首先，我們應該知道藥物的分子量、溶解度以及規格。如果是毫克級小包裝，一般不需要稱量分裝，直接在原瓶中溶解配成儲存液。

以ROCK抑制劑Y-27632為例，產品信息如下：

該藥物推薦溶劑DMSO，同時，最大只能配成129.38mM的儲存液。這一點非常重要。有些人沒有注意藥物溶解性，直接在非水溶性藥物中加入PBS配置，結果藥物不溶，“損失慘重"。

假如我們需要配置10mM儲存液，計算公式如下：

  質量（mg）= 濃度（mM）x 體積（L）x 分子量  （1）
5（mg）= 10（mM）x ?（L）x 247.34

即向含5mg Y-27632的原瓶中加入2.02mL DMSO，即可配制成10mM溶液。（注：此處要預估原瓶的容量，如果原瓶容量小于2 mL，應考慮配置更大濃度的儲存液，如20mM，加入1.01 mL DMSO）。

此外，我們也會經常遇到質量濃度和摩爾濃度單位轉換，同樣以10mM Y-27632為例：

10mM=10mmol/L，化合物分子量為247.34，即247.34g/mol=247.34mg/mmol

10mmol/L x 247.34mg/mmol = 2473.4mg/L= 2.4734mg/mL

即10mM Y-27632溶液相當于2.4734mg/mL

濃度快速換算法則：

1）mM轉換mg/mL，摩爾濃度數值乘以分子量再除以1000；

2）mg/mL轉換mM，質量濃度數值除以分子量再乘以1000。

我們買來抑制劑的凍干粉，配制儲存液的濃度為10mM，如果需要使用終濃度為25uM進行細胞實驗，需要加入多少抑制劑儲存液呢？記住下面這個稀釋公式就可以了：

起始濃度 x 起始體積 = 最終濃度 x 最終體積

  C1（mM） x V1（mL）= C2（mM）x V2（mL） （2）

首先，

注意單位，我們假設最終體積為2mL，代入公式：

10（mM）x V1（mL）= 0.025（mM）x 2（mL）

即我們需要吸取5uL的儲存液進行實驗操作。

我們在使用二硫蘇糖醇(DTT)做實驗時，會遇到這樣的問題：已發表的文獻中使用0.1%的DTT溶液，而你購買的DTT為1mol/L的儲存液，那么這該如何換算呢？請聽小愛為您解答：

DTT的分子量為154，即154g/mol，儲存液換算成質量濃度C1為

154g/mol x 1mol/L = 154g/L

假設需配制1L的0.1%DTT溶液，即V2 = 1L = 1000mL

0.1% DTT溶液為0.1g/100mL = 1g/1000mL = 1g/L，即C2 = 1g/L

再使用公式（2）C1 x V1 = C2 x V2 可得：

154（g/L）x V1（L）= 1（g/L）x 1（L）

V1 = 6.5mL，即吸取6.5mL 1mol/L的DTT儲存液，加入993.5mL稀釋液中即可獲得0.1%的DTT溶液。

如果我們購買的是固體二硫蘇糖醇，配制0.1%的DTT溶液方法如下：精確稱取1g二硫蘇糖醇，用水定容至1000mL即可。

DL-二硫蘇糖醇應用：

※ 作為牛奶中主要過敏原αs1-酪蛋白的還原和烷基化反應物之一；

※ 作為精子去膜和再激活培養基的一個組分；

※ 因硫醇可有效保護生物催化劑的活性位點而維持酶的穩定性；

※ 作為還原劑用于測試N-乙基馬來酰亞胺與巰基反應的特異性。

產品信息：

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Absin特色產品線：

WB相關：ECL發光液、預染marker、預制膠；IHC相關：二抗試劑盒、組化筆；IP/CoIP試劑盒；激動劑/抑制劑；血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE；凋亡試劑盒；呼吸爆發試劑盒；ELISA試劑盒；重組蛋白；抗體: 二抗、標簽抗體、對照抗體；定制服務(抗體/多肽/蛋白/標記/檢測)...