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                探秘黑膠蟲(上)

                更新時間:2023-05-19      點擊次數(shù):1133

                黑膠蟲污染是一個老生常談的話題。目前,科研界對黑膠蟲的污染特征沒有統(tǒng)一的判定標(biāo)準(zhǔn),通常污染特征總結(jié)有:

                1)活躍游動或旋轉(zhuǎn)梭動或原地顫動(如視頻1、2、3所示);



                視頻1 活躍游動


                視頻2 旋轉(zhuǎn)梭動


                視頻3 原地顫動


                2)
                呈桿狀、球狀、卵圓狀;

                3)培養(yǎng)基不渾濁;

                4)復(fù)蘇或傳代時往往會出現(xiàn)黑膠蟲污染,并且與細(xì)胞呈現(xiàn)此消彼長的現(xiàn)象。

                我們對多個黑膠蟲樣本進行測序鑒定,這里舉兩個典型鑒定結(jié)果給大家分享:



                圖1 Sphingomonas(鞘氨醇單胞菌)單個及菌落圖

                屬名

                樣本2,15,21,27鑒定為Sphingomonas sp.(鞘氨醇單胞菌屬)

                能否游動

                以單側(cè)生極性鞭毛運動

                類別

                G-菌

                形狀

                桿狀;菌落為黃色

                大小

                0.3-0.8 * 1.0-2.7µm

                特點

                該菌屬至今共有12個種,是一類豐富的新型微生物資源,可用于芳香化合物的生物降解,在環(huán)境保護及工業(yè)生產(chǎn)方面具有巨大的應(yīng)用潛力

                分布范圍

                河水、根際、地表及深層的地下的沉積物、海洋,連極地土壤中都有它們的蹤跡


                圖2 Brevundimonas vesicularis(泡囊假單胞菌)單個及菌落圖

                屬名

                樣本4,19鑒定為Brevundimonas vesicularis(泡囊假單胞菌)屬于Brevundimonas sp.(短波單胞菌屬)

                類別

                G-菌

                形狀

                桿狀;菌落為圓形,凸起,表面濕潤光滑,邊緣整齊

                大小

                0.4-0.5X 1-2μm

                代表種

                泡囊短波單胞菌是一種較罕見的非發(fā)酵性病原性假單胞菌,在人體可引起肺炎、敗血癥、皮膚炎癥和壞死性蜂窩織炎等

                分布范圍

                通常存在于土壤、河流等自然界中


                這些黑膠蟲樣本被鑒定為細(xì)菌。另外我們也查閱了大批文獻,十幾年前就有人做了相關(guān)研究,很多都鑒定為細(xì)菌,例如以下這篇[1]



                圖3 客戶文獻截圖


                這篇文章講述的是,首先從黑膠蟲污染細(xì)胞樣本中分離得到黑膠蟲,然后從黑膠蟲中提取基因組
                DNA進行基因測序及分析,鑒定出的黑膠蟲為無色桿菌屬(Achromobacter)

                細(xì)菌已經(jīng)在地球上存在三十多萬年了,具有不同的形狀,根據(jù)形狀主要分為三類,即:球菌、桿菌和螺旋菌(包括弧菌、螺菌、螺桿菌)(圖4)。鞭毛是著生在細(xì)菌表面的絲狀運動器官。由于鞭毛很細(xì),只有用特殊的染色法,才能用光學(xué)顯微鏡觀察到。直徑12~25nm,長3~12μm,柔軟、波形(圖5)。


                圖4 細(xì)菌模式圖和細(xì)菌形狀分類



                圖5 細(xì)菌鞭毛分布圖

                單生(一根鞭毛著生于一端)

                雙生(兩根鞭毛分別著生于兩端)

                單叢生(一叢鞭毛著生于一端)

                雙叢生(兩叢鞭毛分別著生于兩端)

                周生(多根鞭毛遍布于菌體上)


                鞭毛有三種運動方式:在液體中泳動,在固體表面上滑行,在液體中旋轉(zhuǎn)梭動。所以難怪,我們看到的黑膠蟲不是在液體中活躍游動,就是在液體中旋轉(zhuǎn)梭動,這就和黑膠蟲被鑒定為細(xì)菌的結(jié)果相吻合了。

                黑膠蟲污染頑固,如何消殺,胞胞巴適有秘方——黑膠蟲清除劑,其所含有的多肽活性成分,相比傳統(tǒng)抗生素有效清除黑膠蟲;清除周期短,視黑膠蟲污染程度通常3-6天可有效去除;廣譜性強,可有效清除常見支原體污染。


                本期講解就到這了,請持續(xù)關(guān)注愛必信公眾號,等待探秘黑膠蟲(下)。

                [1] Jennifer Sue Gray, Janette Marie Birmingham, Jenifer Imig Fenton. Got black swimming dots in your cell culture? Identification of Achromobacter as a novel cell culture contaminant[J]. Biologicals, 2010, 38(2):273-7.

                注:圖源網(wǎng)絡(luò)和客戶,僅供參考學(xué)習(xí)用。


                表1 細(xì)胞培養(yǎng)類產(chǎn)品推薦

                貨號

                品名

                規(guī)格

                abs981

                胎牛血清(特級)

                500ml

                abs972

                胎牛血清(優(yōu)級)

                500ml

                abs974

                胎牛血清(標(biāo)準(zhǔn)級)

                500ml

                abs9483

                高糖DMEM培養(yǎng)基

                500ml

                abs9484

                RPMI-1640培養(yǎng)基

                500ml

                abs9505

                MEM培養(yǎng)基

                500ml

                abs9506

                α-MEM培養(yǎng)基

                500ml

                abs9554

                Ham's F-12培養(yǎng)基

                500ml

                abs9563

                Ham's F-12K培養(yǎng)基

                500ml

                abs9561

                DMEM/F-12培養(yǎng)基

                500ml

                abs962

                PBS緩沖液

                500ml

                abs970

                D-PBS緩沖液(不含 Ca2+ Mg2+

                500ml

                abs971

                D-PBS緩沖液(含 Ca2+ Mg2+)

                500ml

                abs9257

                Hanks平衡鹽溶液(不含 Ca2+ Mg2+)

                500ml

                abs9258

                Hanks平衡鹽溶液(含 Ca2+ Mg2+)

                500ml

                abs47014938

                胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%),含酚紅

                100ml

                abs47047375

                胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%),不含酚紅

                100mL

                abs9479

                無DMSO無血清細(xì)胞凍存液

                100mL

                abs9417

                無血清細(xì)胞凍存液

                100mL

                abs9473

                細(xì)胞凍存液(含血清)

                100mL

                abs9474

                組織保存液

                100ml

                abs9480

                組織凍存試劑盒

                30ml

                abs9486

                模具

                1個/套

                abs9487

                小刀

                5片/包

                abs9481

                組織復(fù)蘇試劑盒

                50ml

                abs9648

                黑膠蟲清除劑

                200ul

                abs42020125

                卡那霉素B硫酸鹽

                250mg

                abs42018967

                硫酸慶大霉素溶液

                10ml

                abs9244

                青鏈雙抗

                100ml

                abs9245

                青霉素-鏈霉素-慶大霉素混合溶液

                100ml

                abs42013298

                兩性霉素B

                1g

                abs44071148

                制霉菌素

                1g

                abs9246

                青霉素-鏈霉素-兩性霉素B混合溶液

                100ml

                abs9252

                支原體檢測試劑盒

                100T

                abs9375

                支原體清除試劑

                200uL×5

                abs9376

                支原體預(yù)防

                500uL×4

                abs816578

                環(huán)丙沙星鹽酸鹽

                500mg

                abs9374

                水盤抑菌劑

                20ml

                abs9371

                水浴鍋抑菌劑

                100ml

                abs9372

                培養(yǎng)箱除菌劑

                480ml

                abs9373

                細(xì)胞房除菌劑

                480ml




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