支原體清除劑的使用須知
更新時間:2023-07-28 點(diǎn)擊次數(shù):2278
支原體清除劑是一種大小僅為 0.2~0.3 μm,無細(xì)胞壁,可透過一般過濾膜(0.22~0.45 μm)的原核生物,在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,支原體感染發(fā)生率達(dá)到 63%,因而細(xì)胞培養(yǎng)過程中被支原體污染是一個世界性的難題。多篇文獻(xiàn)研究表明:當(dāng)細(xì)胞(特別是傳代細(xì)胞)被支原體污染后,細(xì)胞內(nèi)的 DNA、RNA 及蛋白表達(dá)發(fā)生改變,而細(xì)胞的生長率一般并未發(fā)生顯著的影響,因而細(xì)胞被支原體污染一般難以察覺。本品用于解決因支原體污染而導(dǎo)致細(xì)胞污染或狀態(tài)下降的問題,同時其對于常見的革蘭氏陰性和陽性菌也有一定的清除作用。從而確保研究人員的研究結(jié)果真實(shí)、可信。
支原體清除劑的使用說明:
1、建議現(xiàn)配現(xiàn)用,并保持細(xì)胞密度在 50~一60%。
2、推薦稀釋比例為1:1000。例如 10 mL的培養(yǎng)基加入10 uL支原體清除劑混勻。
3、棄去舊的培養(yǎng)基,用 PBS將細(xì)胞清洗干凈,再加入含有支原體清除劑的新鮮培養(yǎng)基,1天1次,連續(xù)處理3天;或者2天1次,連續(xù)處理5~6天。若細(xì)胞污染非常嚴(yán)重時,需延長處理時間。
4、若細(xì)胞對支原體清除劑敏感,或生長明顯被抑制時,可調(diào)整稀釋比例,如:1:2000或1:3000。
5、處理完畢后,加入新鮮培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中可添加支原體預(yù)防劑預(yù)防支原體再次污染。
6、因支原體清除劑本身具有廣譜抑菌性,為了降低對細(xì)胞的影響,強(qiáng)烈建議不要和其它抗生素同時使用。