PM原代細(xì)胞質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染試劑盒

產(chǎn)品介紹：
這款產(chǎn)品是在Plasmid DNA Transfection Reagent的基礎(chǔ)上進(jìn)一步優(yōu)化研發(fā)成功的專門用于原代細(xì)胞質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)染試劑。它具有非常好的轉(zhuǎn)染性能，可高效轉(zhuǎn)染多種原代細(xì)胞，轉(zhuǎn)染效率高達(dá)70%以上（EGFP質(zhì)粒）。與目前市場上常見的脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑不同，這款產(chǎn)品采用生物可降解材料配制，對細(xì)胞的毒性很低，轉(zhuǎn)染后細(xì)胞死亡率不到10%。使用也非常方便，先將轉(zhuǎn)染試劑與質(zhì)粒DNA混合，再將轉(zhuǎn)染試劑-DNA復(fù)合物直接加入培養(yǎng)細(xì)胞中，血清不影響其轉(zhuǎn)染效果，不必刻意添加或更換培養(yǎng)液，操作十分簡便。

產(chǎn)品特點(diǎn)

1、強(qiáng)大的細(xì)胞轉(zhuǎn)染性能：可高效轉(zhuǎn)染多種原代細(xì)胞，轉(zhuǎn)染效率可高達(dá)85%以上；
2、 極低的細(xì)胞毒性：使用可降解生物材料，細(xì)胞毒性低，轉(zhuǎn)染細(xì)胞死亡率不到10%，大大降低了因細(xì)胞毒性對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，實(shí)驗(yàn)結(jié)果更為客觀；
3、操作簡便，可用于含血清培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞的轉(zhuǎn)染，轉(zhuǎn)染前后不需要更換培養(yǎng)液。

方法步驟（以24孔板轉(zhuǎn)染為例）:

A、細(xì)胞接種:
1、轉(zhuǎn)染前24小時左右對細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)接，培養(yǎng)過夜；
2、確保轉(zhuǎn)染時細(xì)胞密度為90%左右；
3、最好在轉(zhuǎn)染開始之前更換新鮮的含血清培養(yǎng)基，以防轉(zhuǎn)染后孵育 階段細(xì)胞密度太大、營養(yǎng)不足導(dǎo)致細(xì)胞死亡。

B、PM /DNA轉(zhuǎn)染復(fù)合物制備(該步完成后應(yīng)立即進(jìn)行轉(zhuǎn)染):
1、在1.5 ml無菌離心管中加入50µl Trans buffer，再加入適量的轉(zhuǎn)染 試劑，見附表。用移液器輕輕混勻后在室溫靜置5分鐘。
2、在1.5 ml無菌離心管中加入50µl Trans buffer，輕輕混勻，再加入適量的DNA，見附表。用移液器再次輕輕 混勻后在室溫靜置5分鐘。
3、將DNA-Trans buffer合物滴加至PM-Trans buffer混合物中，用移液器輕輕混勻后在室溫靜置15~20分后，立即轉(zhuǎn)染。注意： PM-Trans buffer混合物和DNA-Trans buffer混合物的混合次序非常重要，切勿顛倒。

注意：離心管最好使用聚丙烯離心管。

C、轉(zhuǎn)染:

1、將步驟B制備的轉(zhuǎn)染復(fù)合物滴加至培養(yǎng)基中，邊加邊輕輕晃動培養(yǎng)板以使復(fù)合物均勻分布。加完后，立即將培養(yǎng)板轉(zhuǎn)入培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
2、培養(yǎng)12小時后即可觀察，最佳觀察或收獲時間為24~48小時。
3、PM在培養(yǎng)基中仍有較高的轉(zhuǎn)染效率，因此轉(zhuǎn)染前后不需要換成無血清或低血清培養(yǎng)基。如果轉(zhuǎn)染后需要更換新鮮培養(yǎng)基，請于加入PM /DNA復(fù)合物12~24小時后進(jìn)行。

附表：不同培養(yǎng)體系推薦初始轉(zhuǎn)染條件

儲存/保存方法：

-20℃避光保存，Trans buffer 可保存于2-8°C，有效期1年，使用前輕輕混勻。

試劑盒包裝：

產(chǎn)品用途：

大鼠肝細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、肺泡上皮細(xì)胞、乳腺癌細(xì)胞、肺癌細(xì)胞、大腸癌細(xì)胞、肝癌細(xì)胞等。

* 注意： 本產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)