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產品分類
Product Category詳細介紹
| 品牌 | absin | CAS | - |
|---|---|---|---|
| 分子式 | - | 純度 | - |
| 分子量 | - | 貨號 | abs60322 |
| 規格 | 0.5ml；1.0ml | 供貨周期 | 現貨 |
| 主要用途 | 適用于將質粒DNA轉染入哺乳動物細胞 | 應用領域 | 生物產業 |
產品描述：
Lipofect5000是在研究了國外同類產品性能的基礎上開發的一款高性能通用型核酸轉染試劑，適用于將質粒DNA轉染入哺乳動物細胞。Lipofect5000具有非常優異的轉染性能，可轉染絕大多數貼壁細胞和部分懸浮細胞。在貼壁培養的AAV293細胞中，Lipofect5000質粒DNA（EGFP質粒）的轉染陽性率可高達90%以上，即使對于較難轉染的RAW264.7細胞，Lipofect5000的質粒轉染陽性率也可高達70%。與部分國際品牌相比，Lipofect5000擁有更高的DNA轉染性能，價格也親和，是進行DNA轉染實驗的理想選擇。
產品特點：
1、可高效轉染多種貼壁細胞和部分懸浮細胞等，在貼壁細胞中的轉染陽性率可高達90%以上。
2、 顯著的性價比優勢，轉染性能顯著優于部分國際品牌而價格不足其30%。
產品組分：
Lipofect5000 | Trans buffer |
0.5ml | 25ml |
1ml | 50ml |
應用：
適用細胞系：HeLa,Huh-7，CCD-14Br，SBC-1,A-172，NB-1,COS-7,293T,人肝細胞，原代大鼠肝細胞，雞胚胎心肌細胞等。
貼壁細胞轉染方法步驟（以24孔板轉染質粒DNA為例）:
A、細胞接種：
1、 轉染前一天將細胞鋪板（使用不含抗生素的培養基），每孔1.5-2.0×105個細胞左右，使轉染時細胞密度為80%；
2、最好在轉染開始之前更換新鮮的含血清培養基，以防轉染后孵育階段細胞密度太大、營養不足導致細胞死亡。
B、Lipofect5000/DNA復合物包裝（該步完成后應立即進行轉染）：
1、在1.5ml無菌離心管中加入50ul Trans buffer，并添加適量的DNA（參見附表），用移液器輕輕混勻成DNA稀釋液。
2、使用前混勻轉染試劑，立即往DNA稀釋液中添加適量的轉染試劑，用移液器輕輕混勻。
3、將Lipofect5000/DNA混合物室溫靜置15分鐘后，立即轉染。
注意：離心管最好使用聚丙烯離心管。
C、轉染：
1、將步驟B制備的復合物滴加至細胞培養孔中。輕輕晃動培養板以使復合物均勻分布。
2、 培養24小時后即可觀察，但最佳觀察時間為36小時。如果需要，細胞培養6-24小時后可以更換新鮮培養基，但不是必須。
3、 收獲細胞，進行后續實驗。對于穩定轉染，在轉染24-48小時后，用選擇培養基傳代培養。
儲存/保存方法：
4-8°C 保存，有效期一年，使用前請輕輕混勻。
技術指標：
附 貼壁細胞培養體系推薦初始轉染條件：
培養皿 | 96 | 48 | 24 | 12 | 6 | 10cm 皿 | |
表面積(cm2) | 0.35 | 1.0 | 1.9 | 3.8 | 9.6 | 59 | |
復合物包裝Trans buffer、試劑、DNA量 | Trans buffer(ul) | 10 | 25 | 50 | 100 | 200 | 1000 |
Lipofect5000 (ul) | 0.25 | 0.5 | 1.2 | 2.4 | 4.8 | 24 | |
1ug/ul plasmid (ul) | 0.15 | 0.3 | 0.8 | 1.5 | 3 | 15 | |
培養基(ml) | 0.1 | 0.25 | 0.5 | 1 | 2 | 10 | |
注意事項：
1、剛開始使用，建議進行細胞密度優化實驗，如可在培養板中分別接種1.5×105、2.0×105、2.5×105個細胞，分別進行DNA轉染，以選擇出轉染效果較好的細胞接種密度。
2、應避免轉染復合物中存在血清，因為血清會干擾轉試劑與DNA形成復合物，在轉染過程中不要向培養基中添加抗生素。
溫馨提示：本產品僅作科研實驗使用，不支持臨床等研究
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