類器官凍存液

描述：

類器官凍存液（Organoid Cryopreservation Medium）可應用于多種哺乳動物（ 如人、 鼠） 來源的類器官和細胞系的低溫長期保存。

使用方法：

1. 向回收后的類器官（或細胞） 中加入預冷的（2-8℃）類器官凍存液，吹打混勻后迅速轉移至細胞凍存管中（凍存管內細胞懸液體積應大于 0.5ml）。注意： 每 1ml 凍存液推薦凍存 1x103-1x107 個細胞或對應細胞量的類器官。
2. 將凍存管放入細胞凍存降溫盒內（降溫盒須提前平衡至室溫或 4℃），隨后立即將降溫盒放入-80 ℃超低溫冰箱中；也可將凍存管進行人工梯度降溫處理，如 4℃ 靜置 10 分鐘，-20℃保存 1 小時，-80℃保存過夜。
3. 次日或 12 小時后將凍存管于低溫條件下（不高于-70℃，推薦使用干冰或原降溫盒）轉移至液氮中長期保存。

若類器官（或細胞）復蘇，可按以下步驟進行：
1. 取10 ml類器官培養緩沖液 B于15 ml離心管。
2.  從液氮罐中取出凍存的類器官細胞，快速置于 37℃水浴鍋中融解。
3.  水浴融解過程中，需輕輕搖動冷凍管，以確保凍存液在 1-2 分鐘內融解。
4.  將溶解后的類器官細胞快速轉移至15 ml離心管，使用移液管輕輕吹打6-8次，300 g離心5分鐘，然后除去上清液并收集類器官細胞沉淀。添加適量類器官緩沖液 B重懸移入1.5 ml離心管300 g離心5 min。
5.  基質膠重懸，每孔25 ul基質膠鋪在24孔細胞培養板中，放置培養箱中10-15 min成膠，添加500 ul類器官培養基 A。

注：類器官凍存液（abs9519）可搭配類器官培養基使用。