類器官傳代消化液

描述：

類器官傳代消化液（Organoid Digestion Solution）可應(yīng)用于多種哺乳動(dòng)物（如人、 鼠） 來源類器官的常規(guī)傳代， 可使類器官從基質(zhì)膠中分離， 并可使其溫和地消化為小細(xì)胞簇或單細(xì)胞，同時(shí)保持其傳代后的生長(zhǎng)活力。

使用方法：

1.  移液器吸去培養(yǎng)基，每孔添加1ml 4℃類器官緩沖液 B放置2min。移液搶輕柔吹打基質(zhì)膠，收集在15ml離心管中，4℃靜置10min。（每6-8孔為一組）。
2.  離心5min棄去上清，添加適量類器官傳代消化液消化2-3 min，添加5倍體積類器官緩沖液終止消化，離心5 min棄去混合液，添加類器官緩沖液 B重懸移入5 ml離心管，300 g離心5 min棄去液體進(jìn)行第3步。

注意：① 在此操作過程中須仔細(xì)監(jiān)測(cè)消化過程，避免過度消化。在消化過程中，使用移液器吹打混勻幫助消化。也可實(shí)時(shí)取少量消化懸液于顯微鏡下觀察消化情況，當(dāng)觀察到較多的單細(xì)胞或直徑在 50 um以下的細(xì)胞簇后，即可認(rèn)為消化完成。

② 在確認(rèn)消化完成的懸液中， 加入至少5倍體積的類器官緩沖液進(jìn)行稀釋，從而終止消化作用。
3.  將上步驟所獲類器官沉淀可用于后續(xù)類器官培養(yǎng)、凍存等實(shí)驗(yàn)操作。

注：類器官傳代消化液可搭配類器官培養(yǎng)基使用。