細(xì)胞增殖檢測試劑盒（MTS）

        MTS細(xì)胞增殖檢測試劑盒 (MTS Cell Proliferation Assay Kit)是一種常見的細(xì)胞增殖與毒性檢測試劑盒。MTS是一種新型四唑鹽，可以被活細(xì)胞線粒體內(nèi)的琥珀酸脫氫酶還原成溶于水的產(chǎn)物甲臜(Formazan)。甲臜在490 nm處有特異性吸收，所以可以通過測定490 nm處的吸光度反映細(xì)胞增殖情況。細(xì)胞增殖越快，吸光度值越高。
        與常見的MTT試劑盒相比，本試劑盒無需去除原有培養(yǎng)基，也無需另外使用溶劑溶解甲臜，使用更方便，同時(shí)可以避免去除培養(yǎng)基時(shí)帶走部分甲臜而引起的實(shí)驗(yàn)誤差。本試劑盒使用非常靈活，檢測后可繼續(xù)孵育，以得到更好的顯色結(jié)果。此外，本試劑盒還具有線性范圍寬、靈敏度高、使用安全等優(yōu)點(diǎn)。
產(chǎn)品組分：

實(shí)驗(yàn)操作：
1、MTS工作液配制：
將MTS Solution和PMS Solution按20:1的比例混勻即為MTS工作液。配制好的MTS工作液如需儲(chǔ)存應(yīng)置于-20℃避光保存，此時(shí)建議適量分裝以避免反復(fù)凍融。
注意： MTS Solution 和 PMS Solution 見光都易分解，因此配制和使用過程中都需要避光 (可以用錫紙包住)。如需頻繁使用，想將本試劑盒置于4°C 保存，此時(shí)應(yīng)每次在檢測前配制 MTS 工作液。配制好的未使用 MTS 工作液則需要置于-20°C避光保存。
2、細(xì)胞培養(yǎng)：
將細(xì)胞接種于孔板等合適容器中。對于96孔板，建議每孔加入100uL培養(yǎng)基，同時(shí)建議每孔接種5-100×103個(gè)細(xì)胞。可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)用感興趣的藥物處理實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞一段時(shí)間，此時(shí)需要另外設(shè)立空白組(僅含培養(yǎng)基) 和對照組 (含培養(yǎng)基、細(xì)胞和藥物溶劑)。
注意：具體每孔接種的細(xì)胞數(shù)量可以根據(jù)具體細(xì)胞種類進(jìn)行調(diào)整。
3、MTS孵育：
每孔加入20 uL的MTS工作液，隨后放入細(xì)胞培養(yǎng)箱孵育1-4 h。
注意：MTS 孵育時(shí)間可以根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)進(jìn)行調(diào)整。
4、檢測：
用酶標(biāo)儀于490 nm處測定吸光度(A)。若無490 nm濾光片，可選擇使用450-540 nm濾光片。
5、數(shù)據(jù)分析：
細(xì)胞存活率計(jì)算公式如下
細(xì)胞存活率 (%)= [(A實(shí)驗(yàn)組-A空白組) / (A對照組-A空白組)] ×100

1、細(xì)胞長時(shí)間培養(yǎng)時(shí)，96孔板的邊緣孔容易出現(xiàn)液體蒸發(fā)問題。建議舍棄96孔板的周圍一圈，改加無菌水，培養(yǎng)基或者PBS；同時(shí)可以將96孔板置于培養(yǎng)箱中靠近水源的地方。
2、MTS Solution和PMS Solutin在低溫下會(huì)凝固，使用前請?zhí)崆盎販刂潦覝鼗?7℃水浴約10 min直至融解后使用。
3、MTS Solution和PMS Solution對光照敏感，如果置于4°C保存時(shí)，溶液顏色可能會(huì)發(fā)生輕微變化，這種變化可能會(huì)使本底吸光度值上升，但是不會(huì)影響最終的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
4、如不能及時(shí)檢測，可以在步驟3孵育結(jié)束后每孔加入25uL的10%SDS終止反應(yīng)。經(jīng)SDS處理后的孔板可以放置
于培養(yǎng)箱中避光保存不超過18 h。
5、為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

Store the kit at -20°C away from light and moisture, stable for 1 year. For frequent use, the kit can be stored at 4°C away from light and moisture, stable for 6 weeks.