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                • 問題一:缺乏染色可能的原因檢測方法和相應的措施沒有抗原用原位雜交的方法檢測蛋白表達(有時即使能檢測到mRNA。翻譯也有可能受阻)由于錯誤的儲存方法按照說明書儲存。通常,將抗體按照足夠配制單次實驗工作溶液的體積分裝。儲存在手動除霜冰箱中(-20到-70℃),避免反復凍融無效的一抗或二抗單獨檢查報告系統以評估試劑的有效性。固定不充分嘗試增加固定時間或改用不同的固定劑過度固定減少浸潤或固定后步驟的時間。如果必須使用浸潤法固定(例如病理實驗室中的尸檢組織或切片),可以用抗原修復試劑修...

                  2018-03-26
                • 都說是封閉,羊血清究竟封閉的是什么(抗原?)那接下來加一抗怎么又能反應結合?不是封閉了嗎?封閉的目的是為了減少非特異染色。這里,允許小編介紹下免疫組化中封閉血清的原理,封閉血清的原理主要有兩點:*是待檢樣本會非特異性的和蛋白結合,從而導致背景過高,因此可以用BSA或血清封閉掉這部分非特異性的結合,從這點看,BSA和血清沒有明顯區別。第二是待檢樣本中可能會有Fc受體,可以和抗體恒定區結合,與抗體特異性無關,封閉血清中有抗體,因此用血清可以封閉掉一抗及二抗和樣本Fc受體之間結合。...

                  2018-03-26
                • 問題一:高背景可能的原因解決方法去污劑不溶性蛋白有殘留離心后立即去除上清,沉淀中留有不溶性蛋白質,如果再次有懸浮發生,再次離心洗滌不充分蓋上管蓋離心前反復顛倒幾次非特異性蛋白質與珠子結合珠子用BSA預封閉不充分,確保牛血清白蛋白(組分V)新鮮,新鮮珠子與含1%牛血清白蛋白的PBS孵育1小時,使用前PBS洗3-4次使用的抗體特異性不強使用親和純化的抗體,預先吸收使用太多抗體導致非特異性結合檢查推薦抗體用量。嘗試使用更少的抗體細胞裂解液中含有太多的細胞或太多蛋白,導致洗脫液中很多...

                  2018-03-22
                • 問題一:轉膜不充分可能的原因驗證或解決方法膜沒有*均勻濕透使用100%甲醇浸透膜靶蛋白分子量小于10kDa選擇小孔徑的膜,縮短轉移時間靶蛋白等電點等于或接近轉移緩沖液PH值可嘗試使用其他緩沖液如CAPS緩沖液(pH10.5)或使用低pH值緩沖液如乙酸緩沖液甲醇濃度過高過高甲醇濃度濃度會導致蛋白質與SDS分離,從而沉淀在凝膠中,同時會使凝膠收縮或變硬,從而抑制高分子量蛋白的轉移。降低甲醇濃度或者使用乙醇或異丙醇代替轉移時間不夠對于厚的膠以及高分子量蛋白需要延長轉移時間問題二:背...

                  2018-03-20
                • 注意事項★一定要使用我們盒內配套的電泳緩沖液;★上樣量和濃度不能過高。1.我們的預制膠與哪些品牌電泳槽兼容?●Bio-RadMini-PROTEAN(II/3/TetraSystem);●HoeferMightySmall(SE250/SE260/SE280);●LifeTechnology(Invitrogen);●NovexMini-Cell;●MiniGelTank(A25977)(請與EZbiolab特制擋板配合使用);●北京六一DYCZ-25E;●君意東方JY-SC...

                  2018-03-15
                • WesternBlot(WB)即蛋白免疫印跡實驗,是將蛋白樣本通過聚丙烯酰胺電泳按分子量大小講蛋白分離,再通過電場力將蛋白轉移到雜交膜上。然后通過一抗/二抗復合物對靶蛋白進行特異性檢測的方法。WB是進行蛋白質分析zui流行和成熟的技術之一。在WB過程中,分子量Marker就像個螺絲釘一樣,只是個小細節,然而就是這樣一個小細節對實驗結果有著不可忽視的作用。這個WB參照家族的一員的作用主要是用來指示蛋白條帶所對應的分子量大小,只有標準量無誤了,實驗結果才有說服力,除此之外,蛋白標...

                  2018-03-13
                • 雞胚提取物它的K、Fe、Se礦物元素和維生素A、D、B2等含量也很高。這使得它不但具有補充這些營養素的作用,而且,還可能有一些保健功能。本試驗用低硒飼料喂飼的小鼠4周后,各劑量組和低硒對照組動物全血GPX活性抑制率30%,試驗至8周末,低硒組血硒降低,全血GPX活性抑制率仍30%。說明硒營養不良動物模型建立成功。而且,低硒組動物的血硒、GPX活性保持在較低水平,顯示硒營養不良動物模型穩定。小鼠的腦、肝硒含量均降低(P0.05),腦、腎、肝GPX也顯著性降低(P0.05),而全...

                  2018-03-12
                • 免疫學三大工具,IHC、Westernblot、ELISA,分別用于定位,定性和定量!IHC(免疫組化)是融合了免疫學原理(抗原抗體特異性結合)和組織學技術(組織的取材、固定、包埋、切片、脫蠟、水化等),通過化學反應使標記抗體的顯色劑(熒光素、酶、金屬離子、同位素)顯色,來對組織(細胞)內抗原進行定位、定性及定量的研究(主要是定位)。樣本是細胞或組織,要在顯微鏡下觀察結果,可能出現膜陽性、質陽性和核陽性。ELISA(酶聯免疫吸附試驗)用到了免疫學原理和化學反應顯色,待測的樣品...

                  2018-03-09
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